Cisbio激酶、GPCR重要工具、代謝積極拓展新的領域、免疫標(biāo)記試劑HTRF®技術(shù)

HTRF®是均相時間分辨熒光技術(shù)的簡稱，HTRF®技術(shù)是對TR-FRET技術(shù)的進一步改良更優質，提供了更高的靈敏度和穩(wěn)定性相對開放，為法國Cisbio公司的zhuanli技術(shù)。

Cisbio Bioassays是一家超過50年歷史的生命科學(xué)脫穎而出、醫(yī)療診斷和藥物研發(fā)公司拓展應用，最初在體外診斷方面的成就提供了豐富的免疫化驗的經(jīng)驗，這方面的經(jīng)驗與Jean-Marie Lehn 教授（1987年諾貝爾化學(xué)獎得主）在稀土熒光特性方面研究合作結構，造就了如今的HTRF技術(shù)管理。如今，HTRF®在藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域成為了*受歡迎的方法之一能力建設。*各大制藥企業(yè)模樣、藥物研究所和新藥篩選中心都將HTRF®作為重要的化合物篩選方法進行藥物研發(fā)。

Cisbio Bioassays公司主要提供基于HTRF®技術(shù)的完備整套產(chǎn)品服務，涉及藥物篩選很重要、疾病診斷、免疫學(xué)分析等多個方面，包括激酶異常狀況、GPCR研究、代謝、免疫標(biāo)記試劑等統籌發展。在*高通量篩選領(lǐng)域（HTS）行業內卷，Cisbio公司占據(jù)了TR-FRET市場的主導(dǎo)份額。

我們北京諾博萊德科技有限公司作為Cisbio Bioassays公司的經(jīng)銷商為客戶提供逐漸完善，正規(guī)進口參與能力，貨期穩(wěn)定，折扣好的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)是目前主流。

Cisbio Bioassays公司部分產(chǎn)品簡介：

HTRF®技術(shù)： 免洗的Elisa充分發揮，傳統(tǒng)Elisa的替代技術(shù)，跟傳統(tǒng)的Elisa有wuyulunbi的優(yōu)勢：

操作非常簡單：空板直接加樣充分發揮，加完即可檢測選擇適用。

體系非常穩(wěn)定：7天之內(nèi)可隨時檢測，信號基本不變設計。

數(shù)據(jù)客觀真實：可有效去除背景熒光業務指導，假陽性率、假陰性率低就此掀開。

HTRF®原理

HTRF®（均相時間分辨熒光長足發展，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence ）是一種用來檢測純液相體系中待測物的技術(shù)。該技術(shù)結(jié)合了熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET穩步前行，Fluorescence Resonance Energy Transfer） 和時間分辨熒光 （TRF, Time-Resolved Fluorescence)）兩大技術(shù)結構不合理。

熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）

利用兩種熒光基團，分別稱為能量供體（Donor）和能量受體（Acceptor）逐步改善。在供體和受體相互靠近時意見征詢，能量從供體轉(zhuǎn)移到受體上，并使后者發(fā)出熒光大大提高。

由于受體分子的發(fā)射光來自于能量轉(zhuǎn)移的必然要求，所以在實驗中無需包被、無需將未結(jié)合與已結(jié)合的分子分開取得了一定進展，即無需洗滌步驟運行好。

時間分辨熒光（TRF）

利用稀土元素中鑭系元素的*性質(zhì)，其熒光比普通熒光持續(xù)時間更長可能性更大。普通熒光的半衰期為納秒級，鑭系元素的半衰期為毫秒級搖籃，有6個數(shù)量級的差別技術。所以在檢測時，TRF有一個時間延遲-50微秒，從而使普通背景熒光信號幾乎為零相對較高。因此TRF的背景非常低堅持好，反映樣品實際情況。

HTRF®的技術(shù)創(chuàng)新點

HTRF®的能量供體是銪（Eu3+）和鋱（Tb2+）的穴狀化合物（如右圖）大幅增加。在穴狀化合物里特性，Eu和Tb被yongjiu地嵌合在一個籠子中，結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定等特點，對溫度建言直達、PH值、金屬離子將進一步、螯合物等耐受性*充分發揮。

HTRF®的能量受體為XL665和d2。兩者激發(fā)波長為620 nm成就，發(fā)射波長為665 nm重要方式。XL665是改良過的別藻藍蛋白（APC），其將APC的亞基偶聯(lián)系統，使其不能解離非常重要，增加了穩(wěn)定性。d2是第二代受體空間廣闊，光譜學(xué)特征與XL665相同營造一處，但分子量較小，約為1KD支撐能力，可減少空間位阻對實驗的可能影響資源優勢。

HTRF®的操作步驟

HTRF®的操作步驟非常簡單，只需要將實驗所需試劑加進去特征更加明顯，然后孵育估算、檢測即可

HTRF®的數(shù)據(jù)分析

HTRF®采用了比值法來處理數(shù)據(jù)，可以去除由于溶液通透率的可能性、細胞大小不要畏懼、細胞數(shù)量不同引起的誤差。

HTRF®的應(yīng)用范圍

G蛋白偶聯(lián)受體研究：受體第二信使檢測  受體配體結(jié)合  胞內(nèi)信號分子檢測

激酶活性檢測：胞外激酶活性檢測 胞內(nèi)激酶活性檢測

生物標(biāo)志物檢測：基于抗體的夾心法和競爭法檢測

抗體檢測：抗體重鏈含量測定問題、抗體輕鏈含量測定

生物過程分析：GST含量測定逐漸顯現、HIS含量測定、CHO宿主蛋白含量測定

免疫過程分析：CD16結(jié)合檢測系統穩定性、CD32結(jié)合檢測拓展基地、CD64結(jié)合檢測

相互作用分析：蛋白-蛋白、蛋白-多肽實力增強、蛋白-DNA分享、蛋白-RNA

蛋白修飾：蛋白甲基化共享、蛋白乙酰化方式之一、蛋白泛素化生動、蛋白水解

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