在使用程序降溫盒時(shí)有哪些注意事項(xiàng)呢善謀新篇?
更新時(shí)間:2021-11-06 點(diǎn)擊次數(shù):1218次
細(xì)胞凍存有兩種方法:傳統(tǒng)的方法是利用冷存管處于4℃探索、 -20℃技術交流、 -80℃保存先進的解決方案,程序降溫方法是利用程序降溫盒設(shè)定程序由室溫降低至-80℃,最后再放置到液氮槽中長(zhǎng)期保存創造更多。
程序降溫盒的使用注意事項(xiàng)如下:
實(shí)驗(yàn)室雖然有程序降溫凍存盒宣講活動,但怎么使用一直都搞不明白,我覺(jué)得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時(shí)間(細(xì)胞剛開始還沒(méi)凍的時(shí)候就是室溫)工藝技術,然后把細(xì)胞放進(jìn)去效率,再一起移到-80度規模,這樣才能實(shí)現(xiàn)程序降溫呢?
時(shí)間使用長(zhǎng)了,感覺(jué)里面的液體是不是異丙醇啊講道理,使用時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)不會(huì)揮發(fā)或變質(zhì)什么的發展目標奮鬥,要不要添加或維護(hù)一下呢,還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分更多的合作機會,要補(bǔ)充嗎?
經(jīng)驗(yàn)1:凍存盒外表面有刻度的吧延伸,異丙醇液面要高于最底線。
凍存盒肯定是先放在室溫行業分類,然后放進(jìn)去細(xì)胞技術特點,置于-80,利用異丙醇實(shí)現(xiàn)梯度降溫發展邏輯。
根據(jù)論壇里的討論凝聚力量,異丙醇使用過(guò)一段時(shí)間后是要更換的,但是我一直沒(méi)換過(guò)聽得進,也沒(méi)發(fā)現(xiàn)很大問(wèn)題範圍和領域。
經(jīng)驗(yàn)2:我們實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度,需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來(lái)用就可以了各項要求。第二天轉(zhuǎn)移至液氮更高要求,貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移,不然會(huì)影響復(fù)蘇成活率的新技術。一般是用5次就更換一下異丙醇」餐瑢W習,F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的,很方便深入,效果也不錯(cuò)的效高。
經(jīng)驗(yàn)3:異丙醇的量是要保證的,不能低于表明的線基礎,否則不能起到很好的程序性降溫作用性能,我們是在4度放置,放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱對外開放,第二天再轉(zhuǎn)移到液氮技術創新,效果很不錯(cuò)。異丙醇熔點(diǎn):-87.9度的色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹杂卸疽后w資料。注意了有可燃性!急性毒性:口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤廣泛應用。刺激數(shù)據(jù):眼睛- 兔子100 毫克/ !請(qǐng)注意清理!
經(jīng)驗(yàn)4:應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的,因?yàn)樘荻冉禍氐钠鹗键c(diǎn)是室溫20°左右橫向協同,所以從-80℃拿出來(lái)的凍存盒應(yīng)該現(xiàn)在室溫靜置一段時(shí)間待其恢復(fù)到室溫再使用組合運用。而其中的異丙醇應(yīng)使用6~7此后更換一次,而且保證液體量達(dá)到刻度線迎難而上,否則降溫效果會(huì)受到影響積極。
經(jīng)驗(yàn)5:凍存盒里的異丙醇一般是250ml探索,低于刻度了要加上,理論上是5次以后更換異丙醇產業,但是異丙醇對(duì)環(huán)境有害滿意度,我們可以多用幾次,只是少了的時(shí)候要加滿可持續。還有凍存液里面的DMSO 對(duì)細(xì)胞有毒性主要抓手,尤其是室溫的時(shí)候,所以凍存盒和凍存液先放4°構建,等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里創新科技,還放回4°,等到出細(xì)胞間的時(shí)候再拿到-80°里面保存覆蓋。過(guò)夜再轉(zhuǎn)入液氮異常狀況。
程序降溫盒這個(gè)梯度降溫可大大提高細(xì)胞凍存的存活率,由于程序降溫盒內(nèi)存在99.99%濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯高效,因此程序降溫盒也可以用于細(xì)胞復(fù)蘇