羅氏蛋白酶K是一種用途廣泛的非特異性的絲氨酸蛋白酶重要平臺。在pH 4到pH 12的條件下均有活性，在SDS、尿素或EDTA存在時(shí)亦很穩(wěn)定應用提升。羅氏蛋白酶K常用于提取mRNA主動性、基因組DNA，或用于從各種細(xì)胞中提純DNA和RNA時(shí)消化雜蛋白發展的關鍵。還可用于糖蛋白的修飾道路，以及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究等方面。

　　羅氏蛋白酶K的應(yīng)用比較廣泛真諦所在，它可以消化包圍靶DNA蛋白指導，因此使用羅氏蛋白酶K能夠增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)增強(qiáng)雜交信號(hào)，但在使用羅氏蛋白酶K時(shí)要注意使用的濃度充分，過(guò)高或者過(guò)低都會(huì)破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)進一步完善、核消失等影響試驗(yàn)結(jié)果。

　　羅氏蛋白酶K的作用：

　　蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理競爭力，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用調整推進，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)，提高雜交信號(hào)機製性梗阻。但蛋白酶K的濃度過(guò)高機製、消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或孵育溫度過(guò)高時(shí)，都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞生產效率，導(dǎo)致組織切片的脫落使命責任，細(xì)胞核的消失，從而影響雜交結(jié)果滿意度。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問(wèn)題可持續，并能達(dá)到理想的染色效果主要抓手。

　　羅氏蛋白酶K的配制和保存

　　推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。

　　蛋白酶k配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中構建，輕輕搖動(dòng)創新科技，直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合共創輝煌。加水定容到10ml具有重要意義，然后分裝成小份貯存于-20℃。

　　羅氏蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里大部分，避免反復(fù)凍融強大的功能，有效保證12月。孵育溫度為55至65℃解決方案，理想孵育溫度為58℃優勢，孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。