Qiagen試劑盒適用于使用微型離心機(jī)或真空處理從全血醒悟、血漿數據顯示、血清、血沉也逐步提升、淋巴細(xì)胞以及體液樣品中提取總(基因更多的合作機會、線粒體和病毒)DNA。該試劑盒可處理帶有EDTA認為、檸檬酸鹽和肝素等常規(guī)抗凝劑的新鮮或冷凍的全血樣本服務好,樣品量可達(dá)200μl。整套基因組的操作時(shí)間約為20–40分鐘反應能力,一般可從200μl健康全血中獲得4–12 μg DNA共謀發展,洗脫體積可在50–200μl范圍。
Qiagen試劑盒的抽提原理:
樣品中的DNA可以特異性結(jié)合到QIAamp的硅膠膜上結構重塑,通過(guò)兩次洗滌可以將PCR抑制劑聽得進,如:二價(jià)陽(yáng)離子和蛋白*去除,zui后結(jié)合在離心柱上的純核酸可用水或試劑盒中的緩沖液進(jìn)行洗脫收集先進水平。
Qiagen試劑盒提取DNA開(kāi)始前的準(zhǔn)備工作:
1. 將樣品平衡到室溫(15-25℃);
2. 將水浴或是金屬浴加熱到56℃便利性,以備第4步使用;
3. 將Buffer AE或蒸餾水平衡到室溫,用于第11步的洗脫;
4. 確保Buffer AW1重要平臺、AW2以及QIAGEN蛋白酶已經(jīng)按照說(shuō)明配置完畢;
5. 如果在Buffer AL中出現(xiàn)沉淀物深刻認識,請(qǐng)?jiān)?6℃孵育使其溶解。
開(kāi)始前的注意事項(xiàng):
1. 所以的離心步驟需要在室溫(15-25℃)進(jìn)行;
2. 如果樣品中含有的基因組當(dāng)量少于10000應用提升,請(qǐng)?zhí)砑虞d體DNA(carrier DNA);
3. 200μl全血樣品可以得到約3-12μgDNA主動性。