Biozellen(基質(zhì)膠) Biozellen®3D細胞培養(yǎng)基套裝

Matrigel matrix在體內(nèi)，基底膜是以細胞為基礎(chǔ)的薄層細胞外基質(zhì)》e極參與？祵?span> Matrigel matrix 是從富含胞外基質(zhì)蛋白的 EHS 小鼠腫瘤中提取的基底膜基質(zhì)，其中含有約 60%層粘連蛋白培養、30% IV 膠原和 8%的巢蛋白交流研討。康寧 Matrigel matrix 還含有基底膜聚糖形式、TGF-?建設應用、表皮生長因子、類胰島素生長因子日漸深入、組織纖溶酶原及其他生長因子動力。

北京諾博萊德作為Matrigel matrix基質(zhì)膠的特約經(jīng)銷商，包裝為客戶提供原裝產(chǎn)品互動式宣講、折扣低效高性、貨期短的服務保證。

 以下是Biozellen(基質(zhì)膠)部分產(chǎn)品貨號自動化，如需其他產(chǎn)品請聯(lián)系本店客服提升。

1包被涂層方法：

  康寧基底膜基質(zhì)可以以幾種方式使用。薄層凝膠法適用于在凝膠頂部接種細胞不折不扣，厚層凝膠法允許您在三位基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細胞支撐能力，薄層包被法(不凝膠化)給您提供了復雜的蛋白質(zhì)層，您可以在其上培養(yǎng)細胞高效利用。您的選擇基于您想要實現(xiàn)的最終結(jié)果特征更加明顯，無論是細胞生長估算、附著還是分化。

  注意：在康寧支持網(wǎng)頁上發(fā)布了具體的應用程序*的可能性^戰不懈？祵幓啄せ|(zhì)產(chǎn)品的蛋白質(zhì)濃度是批次特異的并提供在分析證明書上。通過計算需要的特定蛋白濃度(mg/mL)獲得了稀釋康寧基底膜基質(zhì)產(chǎn)品的一致結(jié)果知識和技能。為了維持凝膠化的一致性，我們推薦不要將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到少于 3 mg/mL新模式。請使用冰冷的無血清培養(yǎng)基來稀釋康寧基底膜基質(zhì)實現。通過在冰上移液管上下吸液或渦旋小瓶來混合。

薄層凝膠法

  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)組織了。使用預冷的移液管服務體系，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。

  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上搶抓機遇，以 50 µl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質(zhì)分析。

  3. 將培養(yǎng)板放置在 37 °C ，30 分鐘全面闡釋。

  4. 如果有必要的話非常激烈，請在使用無血清培養(yǎng)基輕柔漂洗前吸出未結(jié)合的材料。請確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面引人註目。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了領域。

厚層凝膠法

  1.  依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預冷的移液管好宣講，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻註入新的動力。

  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上。向康寧基底膜基質(zhì)中加入細胞并使用預冷的移液管懸浮。以150-200 µl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質(zhì)雙重提升。

  3. 將培養(yǎng)板放置在 37°C，30 分鐘∈玛P全面，F(xiàn)在可以添加培養(yǎng)基了表現明顯更佳。細胞也可以培養(yǎng)在這一凝膠的頂部。

薄層包被法

  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)規模。使用預冷的移液管穩定發展，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。

  2. 使用無血清培養(yǎng)基將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到需要的濃度聯動。對于您的應用程序增持能力，您應該完成以經(jīng)驗為主的研究來確定您的最適包被濃度。

  3. 向被包被的容器中加入稀釋的康寧基底膜基質(zhì)行業內卷。加入的量應該足以容易地覆蓋整個生長表面追求卓越。在室溫下培養(yǎng) 1 個小時逐漸完善。

  4. 吸出未結(jié)合的材料并使用無血清培養(yǎng)基輕柔地漂洗。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了發展契機。

細胞復蘇：

  康寧中性蛋白酶(貨號 354235)廣泛關註，康寧細胞復蘇溶液(貨號 354253)。使用康寧細胞復蘇溶液在冰上 7 小時內(nèi)解聚康寧基底膜基質(zhì)能夠?qū)崿F(xiàn)將生長在康寧基底膜基質(zhì)上的細胞zuiyouxiao地復蘇發力，或者使用中性蛋白酶優勢領先，考慮到連續(xù)培養(yǎng)，中性蛋白酶作為一種金屬酶可以分散細胞共創美好。

2注意事項

  因為康寧基底膜基質(zhì)在 10°C 以上會開始凝膠化推動並實現，所以極其重要的是康寧基底膜基質(zhì)和所有的進入與康寧基底膜基質(zhì)接觸的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基都應該預冷。產(chǎn)品需要放置于冰上覆蓋範圍，并在 2oC-6oC 的冰箱中或者冷室中過夜融化優化程度，蛋白濃度高時可能需要更多時間。操作康寧 Matrigel matrix時奮勇向前，我們建議使用預冷的移液管不斷豐富、吸頭和管子。在實驗的全部過程中請保持康寧基底膜基質(zhì)處于冰上組建。

3常見問題

  康寧高濃度 Matrigel matrix 用于哪些實驗各有優勢？

康寧高濃度的 Matrigel matrix matrix 可適用于體內(nèi)應用研究，如高濃度蛋白可促進腫瘤生長顯著。高蛋白濃度同時可使康寧 Matrigel matrix 注射入小鼠皮下后保持完整快速增長，有利于注射的腫瘤細胞和/或血管生成因子保持原位，便于用于原位分析和/或以后的切除占。

如何將康寧 Matrigel matrix 用于 3D 培養(yǎng)高質量？

怎樣制作 3D 膠？

需要將細胞嵌入到康寧 Matrigel matrix 中嗎激發創作？

康寧高濃度的 Matrigel matrix 可適用于體內(nèi)應用研究前景，如制備厚層包被用于 3D 細胞培養(yǎng)。細胞可以嵌在康寧 Matrigel matrix 中或者接種在康寧 Matrigel matrix 表面（覆蓋法）增幅最大。

使用 Corning Matrigel matrix 時共享應用，需要將移液器吸頭和離心管預冷嗎？

是的標準。因為 Corning Matrigel matrix 在高于 10℃的條件下即會開始成膠示範推廣，我們推薦操作 Matrigel matrix 時使用預冷的移液管、吸頭和離心管即將展開。

Corning Matrigel matrix 會快速聚合嗎持續向好？

Corning Matrigel matrix 在 22℃至 35℃時會快速聚合成膠。

什么情況下充足，需要使用無酚紅 Corning Matrigel matrix進展情況？

對于涉及顏色檢測的實驗的積極性，推薦使用無酚紅 Corning Matrigel matrix，如使用熒光染料或 Drabkins 法計數(shù)內(nèi)皮細胞成管實驗至關重要。對于子宮內(nèi)膜細胞培養(yǎng)不久前，也需使用無酚紅 Corning Matrigel matrix。

此外提升行動，酚紅和非甾體雌激素結(jié)構(gòu)類似能力建設，有類雌激素效應。在實驗動物體內(nèi)可能具有干擾內(nèi)分泌和荷爾蒙代謝的能力研究進展。

如何從 Corning Matrigel matrix 中收獲細胞設計標準？

推薦使用 Corning Dispase 或 Corning Cell Recovery Solution 來收獲培養(yǎng)在Matrigel matrix 中的細胞。

Corning Dispase 相比胰酶互動互補、膠原酶或其他蛋白水解酶能夠更溫和有效地獲得單細胞懸液，不會損傷細胞或細胞表面蛋白意向。對于需要繼續(xù)接種培養(yǎng)或進行檢測的細胞意料之外，使用 Corning Dispase 不會產(chǎn)生損傷。此外形式，Corning Dispase 也可以用于組織分離置之不顧。

對于代謝研究和 RNA 抽提，建議在 4℃使用 Corning Cell Recovery Solution 進行非酶反應的細胞收獲數字化。因為 Corning Matrigel matrix 中含有痕量的 RNA方便，進行RNA 分析時，應設(shè)一個 Corning Matrigel matrix（不接種細胞）的對照組各領域。

其它從 Corning Matrigel matrix 中收獲細胞的方法：

·         降低溫度至 4℃ - 6℃使 Matrigel matrix 解聚應用領域，需要一定的時間并且僅適合一部分應用。

·         離心以破壞 Corning Matrigel matrix 結(jié)構(gòu)進行培訓。

1. Corning® Matrigel® matrix包被過的培養(yǎng)皿可以儲存多長時間呢發展機遇？

包被過的培養(yǎng)皿最好當天使用，具體情況取決于實驗目的法治力量。需要保存的情況下全技術方案，可在37°C培養(yǎng)箱中最多存放7天。保存時Matrigel表面需要使用無血清培養(yǎng)基均勻覆蓋共享，保持濕潤優勢與挑戰。

2.  如何確定Corning® Matrigel® matrix的包被用量？

3. 哪些情況下應該選用薄膠解決方案？什么時候用厚膠呢趨勢？ 3D培養(yǎng)有哪些應用？

薄膠主要用于輔助細胞貼壁貢獻法治，有利于細胞增殖設備製造。如原代細胞培養(yǎng)發展需要，需要一層薄薄的蛋白層輔助，就可以選用薄膠管理；厚膠主要用于3D細胞培養(yǎng)顯示，如大鼠主動脈組織分化為毛細血管樣結(jié)構(gòu)（Ring Assay），以及進行細胞侵襲實驗等效率和安；3D細胞培養(yǎng)實驗設計能力，主要是用于研究細胞與細胞間的相互作用以及復雜結(jié)構(gòu)，如生物組織等深入開展。

詳細信息請參閱Corning® Matrigel® matrix使用指導手冊更為一致。

4. 進行內(nèi)皮管形成實驗，應該選用多大濃度的Matrigel呢技術的開發？

進行該實驗研究與應用，Matrigelzuidi濃度應不低于10mg/mL。

5. 所有的Corning® Matrigel® matrix 都可以用于人胚胎干細胞（hESC） 培養(yǎng)嗎?

不是的更高效。Corning提供專門用于人胚胎干細胞（hESC）培養(yǎng)的Corning® Matrigel® matrix（貨號為 354277）全面協議。該產(chǎn)品生產(chǎn)過程中經(jīng)過嚴格的質(zhì)量監(jiān)控，可以保證hESC培養(yǎng)的一致性具體而言、可重復性和高度可靠性工具。在干細胞培養(yǎng)領(lǐng)域zhiming的STEMCELL Technologies公司，也正是選用此產(chǎn)品包被的培養(yǎng)板喜愛，用于生產(chǎn)其mTeSR®1產(chǎn)品重要的角色。hESC在mTeSR1培養(yǎng)體系中可以維持未分化狀態(tài)，保持標準形態(tài)并正常表達表面標志物向好態勢。

此外平臺建設，Corning BioCoat™ Matrigel matrix提供預包被產(chǎn)品，如預包被的6孔板（貨號354671）貢獻力量。該系列產(chǎn)品不同批次間的Matrigel包被濃度一致推動並實現，方便用戶使用；用于hESC培養(yǎng)特點，可以維持干細胞應有的自我更新能力和多能性積極回應。如果使用非專門用于hESC培養(yǎng)的Corning® Matrigel® matrix培養(yǎng)hESC，細胞培養(yǎng)效果可能不理想又進了一步，不推薦用戶使用多種場景。

6. 做細胞侵襲實驗，需要使用多少Corning® Matrigel® matrix進行包被規劃？

包被24孔通透性支持物擴大公共數據，推薦每孔使用0.1 mL (濃度200-300 μg/mL) ，Corning®Matrigel® matrix貨號為354234, 354230 。

7. Corning® Matrigel® matrix的zuidi成膠濃度是多少核心技術體系？

不同的實驗目的需要不同的Matrigel濃度開拓創新，用戶應該根據(jù)具體的實驗需求確定。Corning®Matrigel® matrixzuidi成膠濃度為 3 mg/mL必然趨勢。稀釋時不要簡單進行體積倍比稀釋促進善治，不同批次間的Matrigel濃度有差異，應該根據(jù)最終工作濃度 (mg/mL)算出需要加入的稀釋液體（如PBS或無血清培養(yǎng)基）的量多樣性。用于體內(nèi)研究的Matrigel發揮效力，為了避免成膠不wanquan，最終工作濃度不應低于 4 mg/mL明顯。

8. Corning® Matrigel® matrix膠塊在體內(nèi)可以維持多長時間安全鏈？

基質(zhì)膠膠塊可以在體內(nèi)維持至少一周的時間。

9. 怎樣稀釋Corning® Matrigel® matrix?

使用冰上預冷的無血清培養(yǎng)基或者PH 7.4的PBS創新為先。

10. 應該如何對Corning® Matrigel® matrix移液操作?

推薦使用預冷的移液器或者注射器操作真正做到，移液管、槍頭同樣需要預冷創新延展。吸液時不要觸及瓶子底部習慣；分液時切忌過快、用力過猛進展情況。如果使用移液管（Pipets），需要分液5mL時綠色化發展，應該吸取6mL至關重要，分液到移液管內(nèi)仍有1mL時即停止；如果使用自動移液器（Pipetman）用上了，按壓到第二檔位吸液提升行動，然后按壓到第一檔位進行分液。

11. 為什么我的Corning® Matrigel® matrix很粘稠密度增加？

基質(zhì)膠的蛋白濃度越高有效性，膠體越粘稠。如果濃度高于13.0 mg/mL機遇與挑戰，基質(zhì)膠會顯得非常厚重廣泛關註。Corning® Matrigel® matrix基質(zhì)膠產(chǎn)品在未稀釋前都會比較粘稠。粘稠的高濃度Corning® Matrigel® matrix(Corning® Matrigel® matrix HC)不稀釋也可以直接使用集成技術，如用于培養(yǎng)腫瘤細胞和/或血管生成因子就能壓製，注射于小鼠體內(nèi)后，細胞可以保持原位適應能力，便于原位分析和/或以后的切除更優美；或者稀釋后，按照標準濃度的Corning® Matrigel®matrix產(chǎn)品使用方法使用防控，具體稀釋濃度根據(jù)實驗需求確定成效與經驗。

除因為產(chǎn)品本身濃度高而粘稠外適應性，基質(zhì)膠的狀態(tài)還與運輸過程中溫度的變化和儲藏條件有關(guān)。整個運輸過程中必須使用干冰冷藏稍有不慎。如果儲藏Corning® Matrigel® matrix的冰箱帶有自動除霜功能重要作用，冰箱除霜過程中升溫，可能使基質(zhì)膠成膠相關性。所以完成的事情，切忌將Corning®Matrigel® matrix儲藏于此類冰箱中。為保證Corning® Matrigel® matrix的使用效果穩定，凍融次數(shù)應該盡可能減少改造層面。拿到新的Corning® Matrigel® matrix后，請按照單次用量進行分裝優勢與挑戰。每次融化操作經驗分享，Matrigel基質(zhì)膠都應該放置于冰上。如果Matrigel基質(zhì)膠在成膠狀態(tài)被凍住趨勢，再次融化時將不能成恢復液體有力扭轉。

12. Corning® Matrigel® matrix可以誘導ES/iPS細胞分化嗎？

可以的一站式服務，已經(jīng)有相關(guān)文章表明 Corning® Matrigel® matrix可以用于ES/iPS細胞的分化研究廣度和深度。

13. 為什么Corning® Matrigel® matrix在37°C成膠，而在4°C時卻呈液體狀態(tài)引領作用？

Corning® Matrigel® matrix是一種從小鼠骨肉瘤中提取的重組基底膜科技實力， 新鮮提取的原料中主要包括以下成分：層粘連蛋白，IV型膠原, 巢蛋白建設，基底膜聚糖在此基礎上、表皮生長因子、類胰島素生長因子及其他生長因子前來體驗。這些蛋白構(gòu)成了Matrigel的基本結(jié)構(gòu)自主研發。在22℃-37℃溫度條件下，大分子間的共價鍵可以結(jié)合更加廣闊，促使Matrigel形成凝膠損耗。而在低溫條件（如4℃）下，由于沒有足夠的能量促使共價鍵結(jié)合非常完善，所以Matrigel呈現(xiàn)液體狀態(tài)積極影響。