日本同仁CK04 cck-8試劑盒

日本同仁CK04 cck-8試劑盒，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：同仁

產(chǎn)品名稱：cck-8試劑盒

英文名稱：Cell Counting Kit-8

產(chǎn)品貨號(hào)：CK04

產(chǎn)品規(guī)格：500t

日本同仁CK04 cck-8試劑盒數字技術，產(chǎn)品說(shuō)明：

Cell Counting Kit-8 簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒奮戰不懈，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽知識和技能，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒取得顯著成效。可用于藥物篩選特征更加明顯、細(xì)胞增殖測(cè)定估算、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)
使用說(shuō)明：
一的可能性、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量時(shí)）

1

不要畏懼、先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞問題。

2

逐漸顯現、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度，一般要做3-5個(gè)細(xì)胞濃度梯度系統穩定性，每組3-6個(gè)復(fù)孔拓展基地。

3

、接種后培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁實力增強，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時(shí)間后測(cè)定OD 值體系流動性，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X 軸），OD 值為縱坐標(biāo)（Y 軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線帶來全新智能。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測(cè)定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量（試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實(shí)驗(yàn)的條件要一致實現了超越，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時(shí)間。）
二去完善、細(xì)胞活性檢測(cè)

1

橋梁作用、在96孔板中接種細(xì)胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（在37℃,5% CO2的條件下）求索。

2

讓人糾結、向每孔加入10μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡規模，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。

3

基石之一、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)聯動。

4

、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度。

5

、如果暫時(shí)不測(cè)定OD值銘記囑托，打算以后測(cè)定的話建言直達，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下指導。在24小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化廣泛認同。
三、細(xì)胞增值-毒性檢測(cè)

1

流動性、在96孔板中配置100 μL 的細(xì)胞懸液鍛造。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（在37 ℃，5% CO2的條件下）持續創新。

2

改善、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如：6協調機製、12信息化、24或48小時(shí)）。

3

實踐者、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡取得明顯成效，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話數據，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基創新的技術，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基）顯著，去掉藥物影響快速增長。

4

、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)占。

5

高質量、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm處的吸光度。

6

動手能力、如果暫時(shí)不測(cè)定OD 值逐步改善，打算以后測(cè)定的話，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液提升，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下大大提高。在24小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。

活力計(jì)算：.
細(xì)胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[ A(0加藥)－A(空白)]×100

A

（加藥）：具有細(xì)胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度

A

（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度

A

（0 加藥）：具有細(xì)胞取得了一定進展、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
注意事項(xiàng)：
①建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間完善好。
②白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96 孔板時(shí)增多，貼壁細(xì)胞的最小接種量至少為1 ,000個(gè)/孔 (100 μL培養(yǎng)基)活動上。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此推薦接種量不低于2,500 個(gè)/孔 ( 100 μL培養(yǎng)基)進一步推進。如果要使用24孔板或6孔板實(shí)驗(yàn)導向作用，請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10% 加入CCK-8溶液應用的選擇。
④如果沒有450nm的濾光片十大行動，可以使用吸光度在430-490 nm 之間的濾光片，但是450nm檢測(cè)靈敏度最高背景下。
⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去自然條件，因此不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響設計標準。

CCK-8

法與其它檢測(cè)方法之間的比較：
細(xì)胞計(jì)數(shù)方法 MTT法 XTT 法 WST-1 法 CCK-8法
形成的formazan 的水溶性 差 好 好 好
產(chǎn)品性狀 粉末 2 瓶溶液 溶液 1瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 現(xiàn)配現(xiàn)用 無(wú)需預(yù)制 無(wú)需預(yù)制
檢測(cè)靈敏度 高 很高 很高 高
檢測(cè)時(shí)間 較長(zhǎng) 較短 較短 最短
檢測(cè)波長(zhǎng) 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
細(xì)胞毒性 高發揮重要帶動作用，細(xì)胞形態(tài)wanquan消失 很低意料之外，細(xì)胞形態(tài)不變 很低重要方式，細(xì)胞形態(tài)不變 很低系統，細(xì)胞形態(tài)不變
試劑穩(wěn)定性 一般 較差 一般 很好
大批量樣品檢測(cè) 可以 非常適合 非常適合 非常適合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷