BCA蛋白濃度測定試劑盒使用說明

本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效解決。本試劑盒用于酶標(biāo)板或者200ul比色皿時(shí)可做500孔。當(dāng)使用2ml比色皿時(shí)可做50孔技術創新，如果是1ml比色皿時(shí)可做100孔。

產(chǎn)品簡介

堿性條件下資料，蛋白將Cu2+還原為Cu+廣泛應用， Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物，測定其在562nm處的吸收值橫向協同，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比哪些領域，即可計(jì)算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS不斷創新，Triton X-100建立和完善，Tween不影響檢測結(jié)果提供了遵循，但受螯合劑(EDTA，EGTA)大型、還原劑（DTT服務效率，巰基乙醇）和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中重要意義，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高統籌發展，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。

使用說明

一體系，微孔酶標(biāo)儀法

1.         配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量生產製造，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁攜手共進，但混勻后就會(huì)消失)共同。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.         稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取10微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至100微升（樣品一般可用PBS稀釋）大部分，使終濃度為0.5mg/ml強大的功能。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4，6解決方案，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中優勢，加PBS補(bǔ)足到20微升。

3.         將樣品作適當(dāng)稀釋（多做幾個(gè)梯度增產，如作2倍便利性、4倍、8倍稀釋）行動力，加20微升到96孔板的樣品孔中提供有力支撐。由于移液器在取小量時(shí)的誤差，標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確良好，所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后逐步顯現。

4.         各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分鐘引領。用酶標(biāo)儀測定A562nm自動化裝置，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時(shí)應用前景，應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果有很大提升空間。

 二，分光光度計(jì)法

如沒有酶標(biāo)儀首次，可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色可能性更大。

步驟如下：

1．配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁技術，但混勻后就會(huì)消失)推廣開來。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2技術研究，  稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取100微升BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋至1ml（樣品一般可用PBS稀釋）重要的，使終濃度為0.5mg/ml開展研究。

3姿勢，  取八支（或者更多）5ml離心管，標(biāo)讓號(hào)首要任務，按下表加入試劑綠色化。

4，  37℃放置15-30分鐘發展。用分光光度計(jì)測562nm處吸光值保持穩定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。