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MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
更新時(shí)間:2016-04-07   點(diǎn)擊次數(shù):2200次

MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

MTT比色法是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法 MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。MTT檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色Formazan并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能積極參與。在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解設計。然后通過酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快改進措施,則吸光度越高就此掀開;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低今年。

NobleRyder MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒采用了NobleRyder自主研發(fā)Formazan solvent信息化技術,使檢測(cè)本底低,靈敏度高良好,線性范圍寬。

產(chǎn)品組成

名稱/編號(hào)

C0290

500T

Storage

試劑(A):MTT solution(5mg/ml)

5mll

-20 避光

試劑(B):Formazan solvent

60ml

RT

使用說明書

1

 

自備材料:

1銘記囑托、細(xì)胞培養(yǎng)液

2引領、胰蛋白酶消化液

3、低速離心機(jī)

4示範、96孔培養(yǎng)板

5應用前景、細(xì)胞計(jì)數(shù)板或計(jì)數(shù)器

6、細(xì)胞培養(yǎng)箱

7提供了有力支撐、搖床

8激發創作、顯微鏡

9、酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀

 

操作步驟(僅供參考)

1進一步意見、細(xì)胞用含血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期增幅最大,常規(guī)胰蛋白酶消化液消化細(xì)胞(懸浮細(xì)胞無(wú)需消化)

2生產能力、低速離心標準,收集細(xì)胞沉淀。

3堅持好、用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀即將展開,制備成單細(xì)胞懸液,并計(jì)數(shù)特性。

4傳承、細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板,一般接種密度為300010000個(gè)細(xì)胞/孔建言直達。通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加3000個(gè)細(xì)胞多種,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入6000個(gè)細(xì)胞將進一步。具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小日漸深入,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定動力。

537 5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)或按照實(shí)驗(yàn)具體需要進(jìn)行培養(yǎng)互動式宣講,一般培養(yǎng)624h效高性。

6、按照實(shí)驗(yàn)具體要求自動化,給予020μl干預(yù)藥物處理提升,37 5%CO2 繼續(xù)培養(yǎng)至合適時(shí)間。

7不折不扣、棄培養(yǎng)液支撐能力,每孔加入10μl MTT solution100μl新鮮培養(yǎng)液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4h高效利用。

8特征更加明顯、棄培養(yǎng)液,每孔加入110μl Formazan solvent數字化,置搖床上低速振蕩10 min方便,使結(jié)晶物充分溶解。如果紫色結(jié)晶較小或較少各領域,溶解的時(shí)間會(huì)短一些應用領域。如果紫色結(jié)晶較大或較多,溶解的時(shí)間會(huì)長(zhǎng)一些進行培訓。

9發展機遇、在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀570nm測(cè)定各孔吸光度。

 

注意事項(xiàng):

1法治力量、MTT solution盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)全技術方案,當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí),請(qǐng)勿使用搶抓機遇。

2分析、由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)全面闡釋,應(yīng)注意蒸發(fā)問題非常激烈。

3MTT solution 在低溫情況下會(huì)凝固引人註目,置于室溫或2025℃水浴至全部融解后使用領域。

4Formazan solvent可以-20℃儲(chǔ)存好宣講,當(dāng)產(chǎn)生沉淀或凝固時(shí)可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解註入新的動力,并且必須在全部溶解并混勻后使用領先水平。

5、觀察formazan是否*溶解雙重提升,亦可以借助光學(xué)顯微鏡觀察戰略布局。

6、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)盡量細(xì)菌避免污染表現明顯更佳。

7狀態、應(yīng)注意設(shè)立OD調(diào)零孔和對(duì)照。

8指導、為了您的安全和健康廣泛認同,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期:12個(gè)月有效流動性。

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