抗酒石酸酸性磷酸酶染液說明書

（tartrate-resistant acid phosphate stain, TRAP stain）

產(chǎn)品用途：

存在于正常人肺泡巨噬細胞等部位的TRAP和存在于細胞白血病人脾臟的TRAP均在細胞濾泡中措施，并不釋放入血液開展試點，血液中TRAP絕大部分來源于破骨細胞深入交流研討。因而測量血液中TRAP可以了解破骨細胞的功能狀態(tài)。本染液可用于石蠟切片深入、血液及骨髓涂片技術研究、細胞爬片完善好、冰凍切片中的破骨細胞染色。

檢驗原理：

在酸性的緩沖液中積極參與，細胞內(nèi)酸性磷酸酶催化底物水解問題分析，其生成物進而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的偶氮染料沉淀交流研討，當?shù)孜镏写嬖诰剖釙r更加完善，該反應只出現(xiàn)在特異性細胞中。

儲存條件及有效期：

本試劑盒室溫密封保存建設應用，有效期3個月支撐作用。所有應用液配置后要立即使用，當天一次用完動力。

所需儀器：

光學顯微鏡同時、染缸、玻片效高性、滴管模式、秒表、記號筆等提升。

試劑組成及配制：

簡明試劑組成表

具體試劑配制及操作：

一講實踐、固定液：液體數字技術，40ml×1瓶

新鮮血涂片、細胞涂片或爬片市場開拓、冰凍切片用固定液固定5～10min措施。石蠟包埋的切片經(jīng)脫臘后不需要再固定。

二要落實好、底物反應液(一)緊密相關、(二)、(三)先進技術、(四)的組成及配制：

●底物反應液(一)組成及配制

組成：(1)A粉×1支    (2)B液500ul×1支

(3)C粉×1支    (4)D液500ul×1支

配制：臨用前將B液用移液器吸入A粉中充分溶解配成甲液培訓，備用

再將D液移液器吸入C粉中充分溶解配成乙液，備用

zui后將甲液與乙液混合成底物反應(一)搶抓機遇，備用

●底物反應液(二)組成及配制：

組成：(1)E粉×1支    (2)F500ul×1支

配制：臨用前將底物反應液二的F液移液器吸入E粉中充分溶解配成底物反應液(二)分析，備用表示。

●底物反應液(三)：G液1ml×1支，備用

●底物反應液(四)組成及配制：

組成：(1)H粉×1支    (2)I液500u l×1支

配制：臨用前將I液移液器吸入H粉中充分溶解配成底物反應液四非常激烈，備用

底物孵育液的配制：

染色缸染色孵育法：

①將底物反應液(一)競爭力所在、(二)、(三)領域、(四)的備用液混合并充分混勻溝通機製，

②先在染缸內(nèi)加30 ml蒸餾水，37℃水浴10分鐘帶來全新智能，

③將底物反應液(一)實現了超越、(二)、(三)去完善、(四)依次加入已預溫的蒸餾水中橋梁作用，

④然后將樣本玻片固定,水洗后還末*干前,，立即將樣本玻片放入已準備好的反應孵育液中求索，避光孵育60分鐘讓人糾結。

三：復染液：蘇木素液，10ml×1瓶

甲基綠液穩定發展，10ml×1瓶

孵育完后基石之一，取出水洗1分鐘，在玻片尚未*干之前進行復染增持能力。

可用蘇木素復染1-2分鐘共同努力，或用甲基綠復染2～3分鐘，兩者取其一

樣本染色前處理及染色：

血涂片及骨髓涂片

1追求卓越、推片：取全血或骨髓3微升左右置載玻片上逐漸完善，將推玻片保持與載玻片30度角，置于血滴正前方合理需求，稍往后移與血滴接觸是目前主流，血滴沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動高質量，至血液鋪完血膜為止充分發揮。滿意效果為不太薄，以免細胞太少共創美好，也不要太厚推動並實現，以免太重疊。

2協調機製、涼干：使涂片在空氣中自然涼干信息化，再放入本試劑盒中的固定液內(nèi)固定2~3分鐘，水洗約30~60秒。

3取得明顯成效、一定注意水洗后不要太干時放入底物液中孵育60分鐘（太干后染色效果欠佳）約定管轄。

石蠟切片

1、二甲苯中脫蠟5~10分鐘創新的技術。再換用新鮮的二甲苯發揮，脫蠟5-10分鐘。

2快速增長、無水乙醇5分鐘開放以來。再90%、70%乙醇各2分鐘高質量。

3提供了有力支撐、水合：蒸餾水2分鐘。

冰凍切片

1前景、回溫：將預先制好的并保存在-20℃冰箱中的冰凍切片放置到切片架上回溫^【注】 約5-10分鐘進一步意見。

【注】：1）可放到37℃孵箱中進行回溫;

       2）在37℃水浴箱中放置一個小盒子，再將從冰箱中取出的切片架放到小盒當中共享應用，目的是讓冰凍切片回溫到37℃生產能力。

2、水合：將回溫好的切片示範推廣，水中浸泡1~2分鐘堅持好。

注意事項：

1、如樣本為骨片的石蠟切片大幅增加，要注意不可用硝酸脫鈣特性，酸脫鈣的方法對蛋白質(zhì)（酶類）傷害較大，從面影響特異性酶染色等特點，會使細胞中的特異性酶失活更加完善，導致酶不能跟底物結(jié)合，從而導致染色失敗建設應用。建議使用抗酒石酸酸性磷酸酶的試劑進行脫鈣，本公司有售左右，咨詢背景下。

2、用底物孵育液進行孵育時要注意避光可靠保障。

染色結(jié)果：

陽性反應為鮮紅色或深紅色顆粒自然條件，定位胞漿。