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細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒 NobleRyder P0914

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• 價   格：
• 更新時間：2024-08-28
• 廠家性質：經銷商

北京諾博萊德科技有限公司供應細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒 NobleRyder P0914量大優(yōu)惠慢體驗，咨詢 ：

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北京諾博萊德科技有限公司供應細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒 NobleRyder P0914量大優(yōu)惠，咨詢 ：      1215878164

產品簡介：

1智能化、在研究細胞時經常要研究細胞的不同組份科技實力，而研究得zui多的兩個細胞組份就是細胞核和細胞漿。分離細胞核蛋白和細胞漿蛋白建設，不僅可以用于研究蛋白在細胞內的定位在此基礎上，而且很多時候分離出來的核蛋白可以用于轉錄調控方面的研究，例如EMSA（也稱gelshift）前來體驗，footprinting等自主研發。
    細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒（Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit）提供了一種比較簡單、方便的從培養(yǎng)細胞或新鮮組織中抽提細胞核蛋白與細胞漿蛋白的方法更加廣闊。約90分鐘就可以完成培養(yǎng)細胞的細胞核蛋白與細胞漿蛋白的分離損耗。抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA非常完善，footprinting性能穩定，報告基因檢測以及酶活力測定等后續(xù)操作。
    本試劑盒是通過細胞漿蛋白抽提試劑A和B作用，在低滲透壓條件下情況正常，使細胞充分膨脹，然后破壞細胞膜技術特點，釋放出細胞漿蛋白提高鍛煉，然后通過離心得到細胞核沉淀。zui后通過高鹽的細胞核蛋白抽提試劑抽提得到細胞核蛋白高質量。
    本試劑盒可以抽提50個樣品也逐步提升，如果每個樣品的數量為約二百萬細胞或約60毫克組織。
包裝清單：

2註入了新的力量、 
保存條件：
    -20℃保存重要的作用，一年有效。
注意事項：
    PMSF一定要在抽提試劑加入到樣品中前2-3分鐘內加入去創新，以免PMSF在水溶液中很快失效足夠的實力。
    抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
    本試劑盒對于組織樣品學習，僅適合于新鮮組織結構重塑，對凍存過的組織抽提效果很差聽得懂。可以抽提的組織樣品數通常不足100個高質量發展。
    使用本試劑盒抽提到的細胞核蛋白與細胞漿蛋白均可直接用我們生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度全方位。但不適合用Bradford法測定蛋白濃度。
    為了您的安全和健康影響力範圍，請穿實驗服并戴一次性手套操作大局。

3、 使用說明：
1. 準備溶液：溫融解試劑盒中的三種試劑邁出了重要的一步，溶解后立即放置在冰上有序推進，混勻。取適當量的細胞漿蛋白抽提試劑A備用需求，在使用前數分鐘內加入PMSF堅定不移，使PMSF的zui終濃度為1mM。取適當量的細胞核蛋白抽提試劑備用更讓我明白了，在使用前數分鐘內加入PMSF迎難而上，使PMSF的zui終濃度為1mM。
2. 對于貼壁細胞：用PBS洗一遍探索，用細胞刮子刮下細胞進一步完善，或用EDTA溶液處理細胞使細胞不再貼壁很緊，并用移液器吹打下細胞競爭力。離心收集細胞調整推進，盡zui大努力吸盡上清，留下細胞沉淀備用機製性梗阻。盡量避免用胰酶消化細胞機製，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。
3. 對于懸浮細胞：用PBS洗一遍集成應用，離心收集細胞探討，盡zui大努力吸盡上清，留下細胞沉淀備用高效流通。
4. 每20微升細胞沉淀加入200微升添加了PMSF的細胞漿蛋白抽提試劑A調解製度。（對于二百萬Hela細胞，其細胞沉淀的體積大約為20微升或40毫克功能。）
5. zui高速劇烈Vortex 5秒深化涉外，把細胞沉淀*懸浮并分散開。（如果細胞沉淀沒有*懸浮并分散開生產製造，可以適當延長vortex時間開展試點。）
6. 冰浴10-15分鐘。
7. 加入細胞漿蛋白抽提試劑B 10微升共同。zui高速劇烈Vortex 5秒推進一步，冰浴1分鐘經過。
8. zui高速劇烈Vortex 5秒，4℃ 12,000-16,000g離心5分鐘力度。
9. 立即吸取上清至一預冷的塑料管中明確了方向，即為抽提得到的細胞漿蛋白∮绿叫侣?？梢粤⒓词褂迷霎a，也可以凍存。（千萬不要觸及沉淀方法，可以在沉淀上方保留極小體積的上清，以免觸及沉淀提供有力支撐。）
10. 對于沉淀切實把製度，*吸盡殘余的上清，加入50微升添加了PMSF的細胞核蛋白抽提試劑自行開發。（不吸盡上清會帶來細胞漿蛋白的污染進行部署。）
11. zui高速劇烈Vortex 15-30秒，把細胞沉淀*懸浮并分散開應用情況。然后放回冰浴中保護好，每隔1-2分鐘再高速劇烈Vortex 15-30秒，共30分鐘表現。
12. 4℃ 12,000-16,000g離心10分鐘特點。
13. 立即吸取上清至一預冷的塑料管中，即為抽提得到的細胞核蛋白結論『椭C共生？梢粤⒓词褂茫部梢?70℃凍存適應性強。
14. 對于新鮮組織：
    A. 把組織盡可能切成非常細小的碎片技術交流。按照20:1的比例混合適當量的細胞漿蛋白抽提試劑A和B（例如200微升細胞漿蛋白抽提試劑A中加入10微升抽提試劑B）。并加入PMSF至zui終濃度為1mM配制成組織勻漿液拓展。按照每60mg組織加入200微升組織勻漿液的比例混合組織和組織勻漿液資源配置，并在玻璃勻漿器內充分勻漿。勻漿需在冰浴或4℃進行相關。
    B. 勻漿后把勻漿液轉移到塑料離心管內大力發展，冰浴放置15分鐘。
    C. 4℃ 1,500g離心5分鐘生產效率。把上清轉移至一預冷的塑料管中不同需求，為抽提得到的部分細胞漿蛋白。（吸上清時千萬不要觸及沉淀保持穩定。）
    D. 對于沉淀總之，到了這一步已經充分勻漿面向，但很多細胞還沒有破碎。接下去按照使用說明的步驟4開始操作研學體驗，即把沉淀當做已經離心收集好的細胞沉淀操作建設項目，按照步驟4至步驟13抽提得到細胞漿蛋白和細胞核蛋白。抽提得到的細胞漿蛋白可以和步驟14C中抽提得到的細胞漿蛋白合并落實落細。

 北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)相結合，是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學試劑製高點項目、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)為產業發展、銷售、服務為一體的生物科技公司有所增加，公司主要經營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等各項要求；產品涉及化工原料、生化試劑越來越重要的位置、分子克隆相關試劑新技術、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器順滑地配合。

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