SYBR Green II（10000×） NobleRyder R0928
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SYBR Green II（10000×）
SYBR Green II RNA染料是一種高敏感的核酸染色試劑越來越重要的位置，可以對RNA或者是單鏈的DNA進行染色綠色化。使用300nm透射光顯影的情況下探索，非變性凝膠中檢測核酸的靈敏度可以達到5×10-7克堅持先行。與傳統(tǒng)的EB染料相比SYBR Green II RNA染料的靈敏度更高，可以應用于雜交前RNA質(zhì)量的檢測滿意度，同時不會影響后續(xù)的轉膜情況較常見，還可應用于變形梯度凝膠電泳（DGGE）和單鏈構象多態(tài)性分析（SSCP）等實驗。SYBR Green II RNA染料可以代替銀染和EB染色主要抓手，消除了銀染復雜體製、費時的缺點構建；與EB染色相比，形成的SRBR Green II -RNA復合物所激發(fā)的熒光是EB-RNA復合物激發(fā)熒光的7倍服務延伸。SYBR Green II RNA染料并不是特異性的結合RNA或者DNA單鏈共創輝煌，但是其對單鏈的結合效率是雙鏈的約2倍，廣泛的應用于RNA的質(zhì)量分析中進一步。
染色方法：
SYBR Green II RNA 染料檢測核酸時即可預染也可以電泳后再進行染色大部分。做預染使用時，取1ul貯存液加入1ml TE緩沖液或者滅菌雙蒸水中混勻實際需求，再加入1ml 的6-loading buffer上樣緩沖液混勻（此時溶液為1：2000稀釋解決方案，即為工作液）電泳時取1-2ul工作液和5ul電泳樣品混勻后直接上樣。注意：須將商品化的核酸MARKER作一定倍數(shù)的稀釋（1/5-1/10）善謀新篇，這樣才能得到比較理想的結果增產。
電泳后染色。電泳后方法，在室溫行動力、避光的情況之下準備染色液。染色液要在塑料器皿中制備而不要在玻璃器皿中發揮作用，因為玻璃表層對該試劑有吸附作用良好。
染料取出后室溫放置，恢復室溫后簡單離心混勻銘記囑托。
染色液使用1×TBE緩沖液進行1：10單產提升，000稀釋。如果是瓊脂糖甲醛變性膠試驗，用1×TBE做1：5勞動精神，000的稀釋。由于SYBR Green II RNA染色液靈敏度高製度保障，所以要選用新鮮的1×TBE緩沖液進行稀釋預下達，以免緩沖液中殘存的雜質(zhì)產(chǎn)生背景，影響實驗結果統籌推進。注意：為了提高染色的靈敏度方案，要確定緩沖液的PH值在7.5和8之間，因為SYBR Green II RNA染色液對PH敏感了解情況。
把膠放在塑料的染色容器中深入，加入足夠染色液使之覆蓋整塊膠。用鋁箔遮蓋或者是放在暗處避光重要的。在染色之前沒有必要先將膠中的變性劑如尿素和甲醛洗出來開展研究，因為SYBR Green II RNA染色液復合物發(fā)出的熒光在甲醛或者尿素存在時不會猝滅。
在室溫下輕輕搖晃凝膠。聚丙烯酰胺凝膠的*染色時間是10-40分鐘首要任務，瓊脂糖凝膠的*染色時間是20-40分鐘綠色化。染色時間也可能隨著凝膠的厚度和濃度變化。由于其熒光本底很低發展，凝膠染色后無需脫色保持穩定。染色工作放在2-8°C避光保存，可以重復使用3-4次面向。注意：SYBR Green II RNA染色液不影響RNA向膜上的轉移和northern中的后續(xù)實驗支撐作用。
染色膠顯色和成像：SYBR Green II RNA染色液復合物所激發(fā)的熒光可以使用300nm和254nm光波照射，通過Wratten 15 濾光片檢測建設項目。注意：由于熒光本底較低規模，所以可以通過適當延長曝光時間的方法檢測痕量的核酸。
請帶手套操作講道理。
貯存
SYBR Green II RNA染色液保存于DMSO溶液中，此貯存液于保存溫度為-20°C通過活化，放置于避光干燥器中落地生根，在以上條件下，可在保存一年健康發展。稀釋工作液在2-8°C可以放置一周有效保障，在室溫放置3-4天。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)長效機製，是一家專業(yè)從事生化試劑講實踐、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)奮戰不懈、銷售市場開拓、服務為一體的生物科技公司，公司主要經(jīng)營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等大大縮短；產(chǎn)品涉及化工原料要落實好、生化試劑、分子克隆相關試劑更默契了、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑先進技術、實驗室常用耗材及儀器。
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