福爾根(Feulgen)DNA 染色液 NobleRyder C0620
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福爾根(Feulgen)DNA 染色液 NobleRyder C0620
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福爾根(Feulgen)染色液說明書
反應(yīng)原理:
DNA 經(jīng)酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開選擇適用,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與 Schiff 試劑結(jié)合設計,形成紫紅色化合物業務指導,使細(xì)胞內(nèi)含有 DNA的部位呈紫紅色陽性反應(yīng)。紫紅色的產(chǎn)生是因?yàn)榉磻?yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)有醌基(醌基是一個(gè)具有顏色的發(fā)色團(tuán))提供堅實支撐,所以含有 DNA 的部位還不大,呈紫紅色。而RNA用此法處理后則分解信息化技術。
試劑組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Schiff試劑 | 100ml | 2-8℃避光 |
重亞硫酸鹽溶液 | 100ml | 2-8℃避光 |
保質(zhì)期:2-8℃避光6個(gè)月。
操作步驟
本染色液采用經(jīng)典方法配制良好,染色方法可參考文獻(xiàn)或者實(shí)驗(yàn)室留傳下來的方法逐步顯現,或者參考下面的方法。
處理準(zhǔn)備標(biāo)本引領,同時(shí)準(zhǔn)備60℃的1M的鹽酸溶液自動化裝置。
1.切片脫蠟入水(洋蔥表皮等類似標(biāo)本,固定應用前景,梯度乙醇后入水)有很大提升空間。
2.切片放入60℃的 1M的鹽酸溶液中約5-15分鐘(水解時(shí)間因標(biāo)本及固定液不同而有差異,)首次。
3.滴加或者浸入Schiff試劑可能性更大,反應(yīng)30-60分鐘(此步為避光反正,在通風(fēng)處搖籃,用完試劑請馬上蓋嚴(yán))技術。
4.吸干或者甩去Schiff試劑(如果不用重亞硫酸鹽溶液洗,此步可直入水沖洗)
5.用重亞硫酸鹽溶液清洗,推動,用完蓋嚴(yán)(一般此步可省相對較高,直接用蒸餾水洗)。
6.在蒸餾水中充分沖洗信息。
7.封片(要保存染色結(jié)果大幅增加,請經(jīng)酒精脫水,二甲苯透明并封片)傳承。 如果只簡單的立刻觀察等特點,可直接在有少量水的情況下壓片。顯微鏡觀察形式。
注意事項(xiàng)
1.此試劑為接到訂單后我公司再配制建設應用,保質(zhì)期一般為6個(gè)月支撐作用。但因?yàn)榻?jīng)常開蓋等原因造成SO2流失,試劑保質(zhì)期會變短動力,如果染色結(jié)果不佳同時,可適當(dāng)加入少量重亞硫酸鈉(鉀),加入量一般為0.1g/L
2.雖然Feulgen法是DNA的特異染色方法效高性,但如果延長水解時(shí)間并在室溫下進(jìn)行反應(yīng)模式, Schiff試劑也與醛、酮提升、醇和縮醛磷脂起反應(yīng)高品質,因此用Feulgen法檢測DNA時(shí)必須嚴(yán)格控制鹽酸水解的時(shí)間和溫度。為減少假陽性和非特異性染色必須做對照實(shí)驗(yàn)支撐能力。
3.由于Schiff試劑能與醛基結(jié)合資源優勢,故不能用含醛的固定液固定組織,常用Carnoy固定液特征更加明顯。Bouin液不適用于Feulgen反應(yīng)估算,因?yàn)楣潭ㄒ褐泻^多的酸,可將DNA水解的可能性,影響染色反應(yīng)不要畏懼。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑問題、分子生物學(xué)試劑逐漸顯現、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售系統穩定性、服務(wù)為一體的生物科技公司拓展基地,公司主要經(jīng)營的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料培訓、生化試劑不合理波動、分子克隆相關(guān)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測常用試劑分析、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器表示。