SYBR Green I(10000×)電泳用 NobleRyder D0028
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SYBR Green I(10000×)電泳用 NobleRyder D0028
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SYBR Green I(10000×)電泳用
SYBR Green I是高靈敏的DNA熒光染料作用,適用于各種電泳分析作用,操作簡(jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗。至少可檢出20pg DNA真諦所在,高于EB染色法25-100倍指導。SYBR Green I 與dsDNA結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝膠樣品熒光信號(hào)強(qiáng)充分,背景信號(hào)低進一步完善。可適用于多種電泳分析競爭力。
SYBR Green I適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠調整推進,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場(chǎng)凝膠電泳機製性梗阻,和毛細(xì)管電泳等機製。
SYBR Green I與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色集成應用,對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq酶探討、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶高效流通、T4連接酶等)沒(méi)有抑制作用調解製度。另外,SYBR Green I與EB相比功能,誘變能力大大降低應用的因素之一。
SYBR Green I核酸染料特點(diǎn)
高靈敏:至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍預期。
信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng)開展試點,背景信號(hào)低。
操作簡(jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗具有重要意義。
適用范圍廣:可適用于多種電泳分析進一步。
使用方便:不影響其它修飾酶作用。
安全性高:分子克隆上明確誘變能力很低
使用方法
SYBR Green I預(yù)染方法
1. 該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳
2. 工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SYBR GreenⅠ稀釋100倍強大的功能,即為SYBR GreenⅠ工作液實際需求。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一個(gè)月以上。
3. 制膠:按常規(guī)方法制膠優勢,不含任何染料善謀新篇。
4. 樣品染色:向分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘便利性,使SYBR GreenⅠ與樣品中DNA充分結(jié)合方法。SYBR GreenⅠ工作液加入量為總上樣量的1/10。
5. DNA Marker染色:將5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混勻提供有力支撐,室溫放置5分鐘切實把製度,使SYBR GreenⅠ與DNA充分結(jié)合保供。(商品Marker稀釋2-5倍后再電泳,否則電泳條帶會(huì)變形進行部署,特別是大片段責任。)
6. 上樣、電泳:按常規(guī)操作保護好。
SYBR Green I后染方法
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳組建。
2. 用PH=7.0-8.5的緩沖液(如:TAE,TBE或TE)特點,按照10000:1的比例稀釋SYBR GreenⅠ濃縮液深刻變革,混勻,制成染色溶液和諧共生。
3. 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中質生產力,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光科技實力。室溫振蕩染色10-30分鐘處理,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色在此基礎上,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上助力各行,讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘相互融合。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過(guò)硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)首要任務。
4. 用紫外儀觀測(cè)。
SYBR Green I使用注意事項(xiàng)
1. 在"SYBR GreenⅠ預(yù)染色方法"中不同需求,電泳時(shí)間不要超過(guò)2小時(shí)發展,否則SYBR GreenⅠ會(huì)從DNA上分離出來(lái),會(huì)產(chǎn)生彌散狀條帶總之。
2. 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過(guò)程中面向,SYBR Green I可以全部從雙鏈核酸上去掉。
3. 如果想對(duì)用 SYBR Green I 染過(guò)的膠進(jìn)行Southern blots研學體驗,建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入0.1%- 0.3%的SDS建設項目。
4. 在紫外照射透視下,與雙鏈DNA接合的SYBR Green I呈現(xiàn)綠色熒光落實落細。如果膠中含有單鏈DNA則顏色為橘黃而不是綠色相結合。
5. SYBR Green對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋製高點項目、貯存為產業發展、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類容器。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū)有所增加,是一家專業(yè)從事生化試劑各項要求、分子生物學(xué)試劑更高要求、實(shí)驗(yàn)耗材及實(shí)驗(yàn)儀器研發(fā)、銷售新技術、服務(wù)為一體的生物科技公司學習,公司主要經(jīng)營(yíng)的進(jìn)口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料聽得懂、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑高質量發展、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測(cè)常用試劑全方位、實(shí)驗(yàn)室常用耗材及儀器。
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