高效動物組織/細(xì)胞總RNA提取試劑盒
適用于快速提取各種動物組織領先水平、細(xì)胞的總 RNA推動並實現，采用 gDNA 過濾器應用創新，高效濾除gDNA發展，不需要繁瑣的DNase I消化過程試驗，提取的RNA深入，可直接用于RT效高，RT-PCR，RT-qPCR基礎，普通轉(zhuǎn)錄組測序性能、RACE、芯片等對外開放。高效動物組織/細(xì)胞總RNA提取試劑盒
高效動物組織/細(xì)胞總 RNA 提取試劑盒
FlashPure Plus Tissue/Cell Total RNA Mini Kit
高效動物組織/細(xì)胞總RNA提取試劑盒
目錄號：91451
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91451-50（50 次） |
裂解液 ACL Plus | 30 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
RNase-Free H2O | 10 ml |
DNA 清除/RNA 吸附通用柱 | 100 套 |
RNase-Free 1.5 ml 離心管 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫（15 ~ 25℃）技術創新，有效期 12 個月。
產(chǎn)品簡介
適用于快速提取各種動物組織有序推進、細(xì)胞的總 RNA設施，采用 gDNA 過濾器，高效濾除gDNA堅定不移，不需要繁瑣的DNase I消化過程更優質，提取的RNA，可直接用于RT推進高水平，RT-PCR脫穎而出，RT-qPCR，普通轉(zhuǎn)錄組測序生產創效、RACE結構、芯片等。
產(chǎn)品特點
1. 無毒：免氯仿優化上下、免β-巰基乙醇能力建設！
2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2生產體系！
3. 高效：提取全過程僅需 10 min服務！
重要提示：
① 第一次使用前，請先在漂洗液 RW 中加入無水乙醇能力和水平，詳見瓶身標(biāo)簽覆蓋。
② 所有離心步驟均需要在室溫（15~25℃）下進(jìn)行。
③ 肝臟研究、脾臟高效、腎臟應用創新、胰腺、心臟的樣本投入量不要超過 10 mg機構。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟：
1. 動物組織：
a．電動勻漿：取新鮮組織 10~25 mg的特性，加入 500μl 裂解液 ACL Plus，電動勻漿攜手共進，直到無明顯組織塊即可共同。
b．液氮研磨：在液氮中研磨組織成細(xì)粉，取 10~25 mg 組織細(xì)粉加入500μl裂解液 ACL Plus經過，劇烈渦旋振蕩 20 sec，充分裂解力度。
c． 將勻漿后裂解物 13明確了方向，000 rpm 離心 3 min。
d．下接步驟 3勇探新路。
2. 細(xì)胞
a．懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞單產提升，加入500 μl裂解液 ACL Plus（<7x106 細(xì)胞），吹打混勻試驗，劇烈渦旋振蕩 20 sec今年，充分裂解。
b．貼壁細(xì)胞：吸棄細(xì)胞培養(yǎng)基結構不合理，可以直接在培養(yǎng)皿中加裂解液ACL Plus進(jìn)行消化動手能力、裂解；或先用胰mei消化后離心收集細(xì)胞意見征詢，再加入裂解液提升，每<7x106細(xì)胞加入500μl裂解液ACL Plus，吹打混勻的必然要求，渦旋振蕩至無明顯細(xì)胞團(tuán)研究成果，使其充分裂解。
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)量表：
培養(yǎng)器皿 24 孔培養(yǎng)板 6 孔培養(yǎng)板 | 面積（cm2） 2 9.6 | 培養(yǎng)液量（ml）1.0 2.5 | 細(xì)胞數(shù)量 5×105 2.5×106 |
3.5cm 培養(yǎng)皿 | 8 | 3.0 | 2×106 |
6cm 培養(yǎng)皿 25cm 培養(yǎng)瓶 100cm 玻璃培養(yǎng)瓶 | 21 25 33 | 5.0 5.0 10 | 5.2×106 5×106 7 x 106 |
3. 將裂解物上清或者裂解物全部加到 DNA 清除/RNA 吸附通用柱中（以下簡稱通用柱）完善好，13,000 rpm 離心 1 min大面積，丟棄通用柱的內(nèi)管，保留濾液（RNA 在濾液中）問題分析。
4. 向濾液中加入0.5倍體積（通常為 250 μl）的無水乙醇培養，吹打混勻。
5. 將濾液混合物全部加入一個通用柱中推廣開來，13,000 rpm 離心1 min推動，倒棄
濾液。此時資源配置，RNA被吸附在膜上信息。
6. 加入700μl去蛋白液 RW1,室溫放置1min,13,000rpm 離心30sec，倒棄濾液。
7. 加入500μl漂洗液 RW豐富內涵，13,000 rpm 離心30sec生產效率，倒棄濾液。
8. 重復(fù)步驟 7適應性。
9. 把通用柱放回收集管中節點，13,000rpm離心2min，che底除去膜上殘留的乙醇落地生根。
10. 取出通用柱的特點，放入新的RNase-free 1.5ml離心管中，向吸附膜的中央懸空滴加30-50μl RNase-Free H2O（事先在70-90℃水浴中加熱可提高產(chǎn)量）有效保障，室溫放置1min大數據，13,000rpm離心1min。
11. 得到的RNA進一步提升，可直接用于下游實驗空間廣闊，或于-70℃保存，以免降解改革創新。
附錄：
一知識和技能、免液氮直接研磨（自動研磨儀）——適用于新鮮樣本
a. 在2.0ml液氮研磨管中加入4mm兩粒，加500μl裂解液ACL plus新模式，放進(jìn)20mg左右的樣本實現，設(shè)置65個頻率，震蕩2min講理論。
b. 將裂解物13,000 rpm 離心3min的可能性，沉淀不能裂解的碎片。
二服務為一體、液氮研磨（自動研磨儀）:
a. 把研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷問題，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。
b. 在2.0ml液氮研磨管中放入3mm鋼珠3粒全會精神，放進(jìn)20-30mg樣本系統穩定性，投入液氮中預(yù)冷。
c. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中集中展示，放進(jìn)研磨儀實力增強，設(shè)置55個頻率，震蕩30~60sec探索創新。（以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例）
d. 研磨完成后帶來全新智能，馬上加500μl裂解液ACL Plus，劇烈渦旋振蕩,充分混勻新產品。
e. 將裂解物13,000rpm離心3min去完善，沉淀不能裂解的碎片橋梁作用。
相關(guān)產(chǎn)品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
高效動物組織/細(xì)胞總RNA提取試劑盒
