植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
適用于提取絕大多數(shù)植物根支撐能力、莖落到實處、葉的有效手段、花的總RNA市場開拓,RNA可直接用于RT資源配置, RT-PCR,RT-qPCR能力建設,RACE模樣,普通轉(zhuǎn)錄組測序等。植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
植物總 RNA 提取試劑盒
FlashPure Plant Total RNA Mini Kit
植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
目錄號:91019
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91019-50(50 次) |
裂解液 PRL | 50 ml |
糖酚去除劑 PAD | 5 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無水乙醇) |
RNase-Free H2O | 10 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
保存溫度
室溫(15 ~ 25℃)保存服務,有效期 12 個月很重要。
產(chǎn)品簡介
適用于提取絕大多數(shù)植物根、莖覆蓋、葉異常狀況、花的總RNA,RNA可直接用于RT重要意義, RT-PCR,RT-qPCR深化涉外,RACE體系,普通轉(zhuǎn)錄組測序等。
本試劑盒是同類產(chǎn)品中適應(yīng)性zui廣泛開展試點,不但可以提取小麥攜手共進、玉米、水稻推進一步、大豆經過、番茄、煙草力度、擬南芥等簡單植物明確了方向,也可以提取茶樹葉片系統性、棉花葉片、葡萄葉片改進措施、楊樹葉片就此掀開、番薯葉片、花生葉片今年、香蕉葉片穩步前行、荔枝葉片、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物動手能力。
如果遇到果實逐步改善、種子、中草藥提升,例如:多糖多酚巨高的作物種子(小麥/玉米/大豆/水稻)大大提高、葡萄果實、藍(lán)莓果實應用前景、百合鱗莖有很大提升空間、土豆塊莖;或者次級代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根首次、虎杖可能性更大、雪蓮等藥用植物,請選擇R513-果實種子總RNA提取試劑盒搖籃。
產(chǎn)品特點
1. 無毒:免氯仿技術、免β-巰基乙醇!
2. 高質(zhì):28s/18s=2:1推動,OD260/280=2.0~2.2相對較高!
3. 高效:提取全過程僅需20分鐘!
注意事項
a. 自備試劑:無水乙醇信息。
b. 提取過程使用 RNase-Free 的吸頭相關;研缽用水che底洗凈,烘箱烘干即可豐富內涵;
c. 樣品加入裂解液PRL勻漿后生產效率,可在–80℃保存一個月以上。
d. 取RNA樣本時適應性,把新鮮組織樣本浸入RNAsafe( RNA樣品保存液節點, 91115-100 ) 中,可在37℃保存一天落地生根,在25℃保存一周的特點,在4℃保存一個月,在-20℃或者–80℃長期保存開展面對面。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟
提示:所有離心步驟必須在室溫(15 ~37℃)下進(jìn)行系統。
第一次使用前非常重要,請先在漂洗液 RW 中加入無水乙醇,加入體積詳見標(biāo)簽
1. 材料處理:
a.取 500 μl 裂解液 PRL提升,轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管中高品質,再加入 50 μl 糖酚去除劑 PAD,混勻備用支撐能力。
注意:對于幼嫩的農(nóng)作物葉片等簡單樣本資源優勢,不加糖酚去除劑 PAD,RNA
的產(chǎn)量可能會提高一些特征更加明顯。
b.液氮中研磨適量植物組織成細(xì)粉估算,取≤50 mg 細(xì)粉轉(zhuǎn)入上述裝有裂解液PRL的1.5ml 離心管中,劇烈渦旋震蕩30sec,充分混勻的可能性。
(冬天氣溫低不要畏懼,37℃搖床振蕩3min,可增強(qiáng)裂解效果問題,提高產(chǎn)量)
c.將裂解物13,000rpm離心 5-10 分鐘逐漸顯現,沉淀不能裂解的碎片。
注意:使用1ml的裂解液PRL和100μl糖酚去除劑去裂解100mg樣品系統穩定性,RNA產(chǎn)量會翻倍拓展基地。
2. 小心吸取上清(一般 480 μl,注意不要吸到沉淀)轉(zhuǎn)入一個新的離心管中實力增強,加入 0.5 倍上清體積的無水乙醇(例如:480μl上清體系流動性,加入240 μl無水乙醇),此時可能出來沉淀帶來全新智能,用移液器吹打混勻實現了超越,不需要離心。
3. 轉(zhuǎn)移上清混合液至 RNA 吸附柱中去完善,13,000 rpm 離心 2 min橋梁作用,倒棄濾液。
注:吸附柱的容積為 750 μl求索,如果混合液超過此體積讓人糾結,請分兩次上柱。
4. 加入700μl去蛋白液RW1結構,室溫放置1min , 13,000rpm離心30sec領先水平,倒棄濾液。
5. 加入500μl漂洗液 RW,13,000rpm 離心30sec雙重提升,倒棄濾液。
6. 重復(fù)步驟 5事關全面。
7. 將RNA吸附柱放回空收集管中表現明顯更佳,13,000rpm 離心2min狀態,除去吸附膜上殘留的乙醇。
8. 取出RNA吸附柱指導,放入 1.5 ml RNase-free離心管中廣泛認同,向RNA吸附膜的中央懸空滴加30~50μl的RNase-free H2O,室溫放置1min流動性,13,000rpm離心 1 min鍛造。
9. 提取的RNA可直接用于下游實驗,或于-70℃保存持續創新,避免 RNA 降解改善。
附錄:
一、免液氮直接研磨(自動研磨儀)——適用于新鮮樣本
a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm兩粒協調機製,加600μl裂解液 ARL信息化,
放進(jìn)20 mg左右的樣本,設(shè)置65個頻率實踐者,震蕩2 min取得明顯成效。
b. 將裂解物13,000 rpm 離心3 min,沉淀不能裂解的碎片數據。
二創新的技術、液氮研磨(自動研磨儀):
a. 把研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷,直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢改進措施。
b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 鋼珠3粒就此掀開,放進(jìn)20-30mg樣本,投入液氮中預(yù)冷今年。
c. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中穩步前行,放進(jìn)研磨儀,設(shè)置 55 個頻率動手能力, 震蕩 30~60 sec逐步改善。(以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例)
d. 研磨完成后,馬上加600μl裂解液ARL重要的意義,劇烈渦旋振蕩,充分混勻持續。
e. 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min,沉淀不能裂解的碎片再獲。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
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