石蠟包埋組織總RNA提取試劑盒帶gDNA過濾器
適用于快速從福爾馬林固定、石蠟包埋組織樣品中提取總RNA推動並實現，提取的RNA，可用于RT，RT-PCR組建，RT-qPCR效果較好，普通轉(zhuǎn)錄組測序再獲、RACE等增多。石蠟包埋組織總RNA提取試劑盒帶gDNA過濾器
FlashPure FFPE Total RNA Mini Kit
石蠟包埋組織總 RNA 快速提取試劑盒
石蠟包埋組織總RNA提取試劑盒帶gDNA過濾器
目錄號：91310
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 保存 | 91310-50（50 次） |
裂解液 PKD | 室溫 | 15 ml |
結(jié)合液 RBC | 室溫 | 25 ml |
漂洗液 RW | 室溫 | 10 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
RNase~Free H2O | 室溫 | 10 ml |
蛋白酶 K（40mg/ml） | ~20℃ | 20 mg |
gDNA 過濾器和收集管 | 室溫 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 室溫 | 50 套 |
RNase~Free 1.5 ml 離心管 | 室溫 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇顯示、二甲苯
保存條件
室溫（15 ~ 25℃）
產(chǎn)品簡介
適用于快速從福爾馬林固定創新為先、石蠟包埋組織樣品中提取總RNA，提取的RNA科普活動，可用于RT創新延展，RT-PCR，RT-qPCR充足，普通轉(zhuǎn)錄組測序進展情況、RACE等。
產(chǎn)品特點
1. 高質(zhì)：28s/18s=2:1綠色化發展，OD260/280=2.0～2.2至關重要！
2. 高效：提取全過程僅需 30 min！
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準
操作步驟
第一次使用前用上了，請先在漂洗液 RW 和 70%乙醇中加入指ding量無水乙醇提升行動，詳見瓶身的標簽。
提示：所有離心步驟必須在室溫（15~25℃）下進行關註。
1. 修整去除過量包埋組織外石蠟研究進展，并切成 5~20 μm 厚切片，開始的 2~3片拋棄不用連日來。
2. 收集總厚度不超過■40 μm 的石蠟切片到一個 2.0 ml 離心管中（例如：2 片 20μm快速融入、4 片 10μm、8 片 5μm 的石蠟切片）系統，或者不超過▲80 μm的石蠟切片到一個 2.0 ml 離心管中增強。
■代表處理切片總厚度≤40 μm，▲代表處理切片總厚度≤80 μm
3. 加入 1 ml 100%二甲苯交流等，渦旋振蕩 10 sec更加廣闊。瞬間離心把組織全部浸入到二甲苯。
4. 50℃水浴 3 min 熔解石蠟提高，20~25℃最高速離心 2 min可以使用，收集到管底。
5. 小心吸棄上清二甲苯紮實，注意不要吸到沉淀稍有不慎。
6. 加入 1 ml 無水乙醇，渦旋振蕩等地，最高速離心 2 min相關性，小心吸棄上清乙醇完成的事情。
7. 加入 1ml 無水乙醇，重復(fù)步驟 6 一遍穩定，盡可能吸棄所有乙醇改造層面。
8. 室溫或者 37℃晾干乙醇 10 min，或直到所有乙醇揮發(fā)干優勢與挑戰。
乙醇wan全晾干非常重要經驗分享，微量的乙醇殘留也會導(dǎo)致 RNA 產(chǎn)量降低。
9. 加入■150 μl ▲240 μl 裂解液 PKD趨勢，渦旋振蕩（或者吹打）有力扭轉，充分重懸組織沉淀，短暫離心收集液體到管底一站式服務，加入 10 μl 蛋白酶 K廣度和深度，吹打混勻。
10. 55℃孵育 15min引領作用，然后 80 ℃孵育 15min加強宣傳。
55℃孵育后，可以將離心管取出放置在室溫用的舒心，等水浴鍋溫度升到 80℃后再放入水浴鍋技術發展，精確的孵育 15min。即使 2min 的延長也可能導(dǎo)致 RNA的部分降解集成。
11. 加入■320 μl ▲500 μl 結(jié)合液 RBC重要手段，充分吹打混勻，調(diào)節(jié)結(jié)合條件穩定性。
12. 轉(zhuǎn)移混合液至 gDNA 過濾器中像一棵樹，14,000 rpm 離心 30 sec，收集濾液（RNA 在濾液中）去突破。
應(yīng)避免吸到較大的未消化wan全的絮團物質(zhì)上柱能運用，以免堵塞離心柱。
13. 加入■720 μl ▲1200 μl 無水乙醇到濾過液中具體而言，吹打混勻。
14. 將≤750 μl 濾液混合液加入 RNA 吸附柱中智慧與合力，13,000 rpm 離心 30 sec發揮重要作用，倒棄濾液。此時數據顯示，RNA 被吸附在膜上高質量。重復(fù)此過程，直到溶液全部上柱記得牢。
15. 加入 500 μl 漂洗液 RW註入了新的力量，13,000 rpm 離心 30 sec重要的作用，倒棄濾液。
16. 重復(fù)步驟 15 一次去創新。
17. 將RNA吸附柱放回空收集管中足夠的實力，13,000rpm離心 2 min，除去乙醇結構。
18. 取出 RNA 吸附柱更適合，放入 RNase~free1.5 ml 離心管中，向 RNA 吸附膜的中央懸空滴加 30 μl 的 RNase~free H2O溝通協調，室溫放置 1 min要素配置改革，13,000 rpm 離心 1 min。
19. 提取的總 RNA保障性，可直接用于下游實驗帶動產業發展，或于~70℃保存，以免降解十分落實。
相關(guān)產(chǎn)品：
71118~100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710~100 Script III All~in~one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600~500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
石蠟包埋組織總RNA提取試劑盒帶gDNA過濾器
