微量/超微量樣品總RNA快速提取試劑盒
適用于從超微量的細(xì)胞、組織技術創新、昆蟲處理方法、植物、細(xì)菌等樣品中提取總 RNA優化服務策略。配有DNase I關規定，在RNA吸附膜上消化gDNA，得到的RNA兩個角度入手，無gDNA殘留建強保護，可直接用于RT，RT-PCR生產效率，RT-qPCR使命責任，普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE等創新延展。微量/超微量樣品總RNA快速提取試劑盒
超微量總 RNA 快速提取試劑盒（帶 DNase I）
FlashPure Total RNA micro Kit(With DNase I)
微量/超微量樣品總RNA快速提取試劑盒
目錄號：91516
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 保存 | 91516-50（50 次） |
裂解液 PRL | 室溫 | 20 ml |
去蛋白液 RW1 | 室溫 | 40 ml |
漂洗液 RW | 室溫 | 10 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
RNase-Free H2O | 室溫 | 5 ml |
糖酚去除劑 PAD | 室溫 | 5 ml |
DNase I | -20℃ | 100 μl |
DNase Buffer | -20℃ | 1.25 ml |
超微量 RNA 吸附柱和收集管 | 室溫 | 50 套 |
RNase-Free 1.5 ml 離心管 | 室溫 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 室溫 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
產(chǎn)品簡介
FlashPure Total RNA micro Kit是超微量總RNA提取的專用試劑盒強化意識，處理范圍一般為細(xì)胞（1~106）或者組織（< 5mg）。
適用于從超微量的細(xì)胞基本情況、組織現場、昆蟲高端化、植物、細(xì)菌等樣品中提取總 RNA我有所應。配有DNase I提單產，在RNA吸附膜上消化gDNA，得到的RNA至關重要，無gDNA殘留發展空間，可直接用于RT，RT-PCR有所應，RT-qPCR足了準備，普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE等著力提升。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 特殊微量 10 μg 離心柱設(shè)計(jì)深刻內涵，可以zui低 6μl 洗脫，可提高 RNA 的濃度融合。
2. 特殊無墊圈離心柱設(shè)計(jì)深入闡釋，確保離心后無液體殘留和污染，保證 RNA純度完成的事情。
3. du有的糖酚去除劑 PAD 可以清除植物多糖多酚或者昆蟲的糖原物聯與互聯，幾丁質(zhì)多糖等雜質(zhì)，提高富含雜質(zhì)的昆蟲和植物 RNA 的提取質(zhì)量協同控製。
4. 無毒：免lv仿振奮起來、免β-巰基乙chun！
5. 高質(zhì)：28s/18s=2:1重要作用，OD260/280=2.0～2.2等地！
6. 高效：提取全過程僅需 30 min！
注意事項(xiàng)：
1. 所有離心步驟必須在室溫（15~25℃）下進(jìn)行尤為突出。
2. 部分含多糖多酚規定、幾丁質(zhì)多糖或者次級代謝產(chǎn)物豐富的昆蟲樣品，或者植物樣品空間載體，提取效果不佳（如降解）可以嘗試在裂解液 PRL 中添加糖酚去除劑 PAD 后提取高質量。具體添加比例為 10 體積（1ml）PRL：1 體積（100μl）糖酚去除劑 PAD。
3. 不是多糖多酚的材料不用加糖酚去除劑 PAD重要組成部分。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟
第一次使用前請先在漂洗液 RW 中加入指ding量無水乙醇流程，詳見瓶身的標(biāo)簽。
提示：
(一) 樣品裂解勻漿：
a．組織（動物勃勃生機、植物助力各業、昆蟲）：≤5mg組織加入300μl裂解液PRL，勻漿至無明顯組織塊。
b．貼壁細(xì)胞：無需消化應用，wan全吸棄培養(yǎng)基后建議，直接在培養(yǎng)板/皿中加入裂解液 PRL 裂解細(xì)胞，并用移液槍反復(fù)吹打相貫通，幫助裂解不斷發展。
（≤105 細(xì)胞加 100μl 裂解液 PRL，≤106 細(xì)胞加 300μl 裂解液 PRL）自動化方案。
c．懸浮細(xì)胞：離心沉淀細(xì)胞(≤500 x g)緊密協作，wan全去除上清后用裂解液PRL 重懸細(xì)胞沉淀【€上線下？啥虝簻u旋振蕩發揮重要作用。
d．其它組織：其他難裂解的組織，細(xì)菌數據顯示，酵母去突破，植物勻漿需配合高速珠磨均質(zhì)儀器和適合裂解珠（玻璃珠，鋼珠達到，鋯珠等）。
(二) 樣品清理：
此步驟為可選步驟情況正常，主要是針對動植物組織和細(xì)胞行業分類，若研磨勻漿后不溶物碎片太多，可將裂解物12,000rpm離心1min提高鍛煉，沉淀裂解困難的碎片或者不溶物發展邏輯，將上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中。對于樣品量很低（細(xì)胞數(shù)≤105）)或勻漿后能充分裂解的樣品無需此步驟有所提升。
(三) 樣品純化：
1. 向裂解物或上清中加入等體積的無水乙醇到上一步的中吹打混勻聽得進。
2. 將上一步的混合液加入超微量RNA吸附柱（吸附柱放入收集管中），13,000rpm離心30sec先進水平，倒棄濾液便利性。此時(shí)，RNA被吸附在膜上重要平臺。
3. 加入350μl去蛋白液 RW1深刻認識，13,000 rpm 離心30sec，倒棄濾液應用提升。
4. DNase I 工作液配制：取 20 μl DNase Buffer 和 2 μl DNase I 至新的RNase-Free離心管中主動性，輕輕吹打混勻。（處理多個(gè)樣品發展的關鍵，按照比例放大）
5. 向 RNA 吸附膜中央加入 22 μl 的 DNase I 工作液道路，室溫放置 15 min。
6. 加入 350μl 去蛋白液 RW1真諦所在，13,000 rpm 離心 30 sec指導，倒棄濾液競爭力。
7. 加入 500μl 漂洗液 RW，13,000 rpm 離心 30 sec規則製定，倒棄濾液製造業。
8. 重復(fù)步驟 7 一次。
9. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中關規定，13,000 rpm 離心 2 min發展基礎，除去膜上殘留的乙醇。
10. 取出 RNA 吸附柱建強保護，放入 RNase-free1.5 ml 離心管中同期，向 RNA 吸附膜的中央部位懸空滴加 30-50μl RNase-free H2O，室溫放置 1 min使命責任，13,000 rpm 離心 1 min效果。
11. 提取的總 RNA，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)情況較常見，或于-70℃保存可持續，以免降解。
相關(guān)產(chǎn)品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
附錄：
一體製、液氮研磨（自動研磨儀）—— 適用于各種樣本
a. 把研磨模塊也丟到液氮中預(yù)冷構建，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。
b. 在 2.0 ml 液氮研磨管中放入 3 mm 鋼珠 3 粒服務延伸，放進(jìn)≤50 mg 樣本共創輝煌，投入液氮中預(yù)冷。
c. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中進一步，放進(jìn)研磨儀大部分，設(shè)置 55 個(gè)頻率， 震蕩 30~60 sec實際需求。（以北京赫得京 N9548 為例）
d. 研磨完成后解決方案，馬上加 550 μl 裂解液 RLA，劇烈渦旋 30 sec善謀新篇，混勻幅度。
e. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5~10 min，沉淀不能裂解的碎片重要的作用。
二貢獻、免液氮直接研磨（自動研磨儀）—— 適用于新鮮樣本
a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中加入 5 mm 鋼珠 1 粒，加 1 ml 裂解液 RLA穩中求進，放進(jìn)≤100 mg 樣本統籌，設(shè)置 60 個(gè)頻率，震蕩 2 min。
b. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5~10 min振奮起來，沉淀不能裂解的碎片品質。
微量/超微量樣品總RNA快速提取試劑盒
