果實(shí)/種子microRNA快速提取試劑盒
適用于提取果實(shí)能力建設、種子覆蓋範圍、中草藥的總 RNA(包括 microRNA 的總 RNA)解決方案,也可以一次性分別提取出 microRNA 和總 RNA(>200 nt)創造更多。果實(shí)/種子microRNA快速提取試劑盒
果實(shí)/種子 microRNA 快速提取試劑盒
FlashPure Fruit/Seed miRNA Mini Kit
果實(shí)/種子microRNA快速提取試劑盒
目錄號(hào):91400
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91400-50(50 次) |
裂解液 FSL | 50 ml |
Wash Solution 1 | 12 ml(需加入指ding量無(wú)水乙醇) |
Wash Solution 2/3 | 10 ml(需加入指ding量無(wú)水乙醇) |
RNase-Free ddH2O | 5 ml |
gDNA 過(guò)濾器和收集管 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無(wú)水乙醇
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
市場(chǎng)上常見的離心柱型的 RNA Kit/總 RNA Kit提供有力支撐,不能有效吸附回收miRNA;Trizol 抽提法也不能有效沉淀回收全部 miRNA(生物通上有專題文章闡述)全方位。
適用于提取果實(shí)、種子影響力範圍、中草藥的總 RNA(包括 microRNA 的總 RNA)大局,也可以一次性分別提取出 microRNA 和總 RNA(>200 nt)。
FlashPure Fruit/Seed miRNA Mini Kit 是糖酚含量巨豐富邁出了重要的一步、次級(jí)代謝產(chǎn)物巨多的果實(shí)有序推進、種子、中草藥等樣本 microRNA 提取的zui jia選擇需求,還可以提取絕大多數(shù)復(fù)雜植物如棉花堅定不移、楊樹、冬青更讓我明白了、月季迎難而上、丹參等 microRNA,當(dāng)然本試劑盒也適用于擬南芥探索、水稻堅持先行、小麥產業、煙草、水稻等各種簡(jiǎn)單樣品情況較常見。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本公司生產(chǎn)的 FlashPure Fruit/Seed miRNA Mini Kit 質(zhì)量?jī)?yōu)異可持續,解決了很多果實(shí)、種子生產體系、中草藥等復(fù)雜植物 miRNA 難以成功提取的世紀(jì)難題服務。
注意事項(xiàng)
1. 如果 FSL 有析出或者沉淀,請(qǐng)將其置于 65℃水浴中能力和水平,重新溶解后使用覆蓋。
2. Wash Solution 2/3 加入乙醇使用幾天后,可能出現(xiàn)沉淀晶體明確相關要求,并不影響使用重要意義,取其上清使用即可。
3. 所有離心步驟均需要在室溫(15~37℃)下進(jìn)行深化涉外。
4. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融體系,否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟:
重要提示:
① 第一次使用前開展試點,請(qǐng)先在 Wash Solution 1攜手共進、Wash Solution 2/3 中加入無(wú)水乙醇,加入體積詳見瓶上的標(biāo)簽推進一步。
② 操作前經過,取 1 ml 裂解液 FSL 至 2 ml 離心管中,加入 5%的 β-巰基乙醇(例如 1 ml FSL 加 50 μl β-巰基乙醇)力度,顛倒混勻后明確了方向,65°C 水浴預(yù)熱。
多個(gè)樣本請(qǐng)按比例放大勇探新路。
③ β-巰基乙醇是裂解液 FSL 的關(guān)鍵成分單產提升,必要的時(shí)候,可以提高終濃度到10~20%試驗,來(lái)防止樣品褐化勞動精神。如果碰到特別復(fù)雜的植物,可以嘗試在裂解液中再加入 PVP40 至終濃度 2%製度保障。
1. 材料處理:
a.在液氮中研磨植物組織成細(xì)粉預下達,轉(zhuǎn)移 30~200 mg 細(xì)粉至 65℃預(yù)熱的裂解液 FSL(已加有 β-巰基乙醇)中,立即劇烈渦旋震蕩 30 Sec統籌推進,充分混勻方案。
注意:水分多的樣品(如草莓、西瓜果肉)投入 150~200 mg;水分含量少的樣品(如成熟的小麥/玉米/大豆種子)投入 30~40 mg應用前景;淀粉含量高的塊莖投入 40~80mg有很大提升空間;葉片投入 50~100 mg。
b.短暫回放至 65℃水浴 5 min首次,中間偶爾顛倒 1-2 次可能性更大,幫助裂解。
c. 將裂解物13,000rpm離心5~10min搖籃,沉淀不能裂解的碎片技術。
d.轉(zhuǎn)移上清有 800~900 μl。
2. 小心吸取 600 μl 裂解物上清轉(zhuǎn)入一個(gè) gDNA 過(guò)濾器中(過(guò)濾器放入收集管中)推動,13,000 rpm 離心 1 min相對較高,保留濾液(RNA 在濾液中),并把濾液轉(zhuǎn)移至一個(gè) RNase-Free 離心管中信息,備用相關。 把 gDNA 過(guò)濾器放入空收集管,再把剩余的上清轉(zhuǎn)入 gDNA 過(guò)濾器豐富內涵,再次 13,000 rpm 離心1 min生產效率,保留濾液備用。
3. 向兩管濾液中分別加入 1.25 倍體積的無(wú)水乙醇 (例如:600 μl 濾液加750 μl 無(wú)水乙醇)適應性,吹打混勻節點。
4. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl濾液混合液至RNA吸附柱中,13,000 rpm離心1min落地生根,此時(shí) RNA 被吸附在膜上的特點,倒棄濾液。重復(fù)此過(guò)程有效保障,直到溶液全部上柱大數據。
5. 加入 700 μl Wash Solution 1(檢查是否已加入乙醇!),室溫放置 1 min,13,000 rpm 離心 30 sec講實踐,棄濾液數字技術。
6. 加入 500 μl Wash Solution 2/3(請(qǐng)檢查是否已加入無(wú)水乙醇!),13,000 rpm 離心 30 sec為產業發展,棄濾液。
7. 重復(fù)步驟 6有所增加。
8. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中各項要求,13,000 rpm 離心 2 min,除去膜上殘留的乙醇越來越重要的位置。
9. 取出 RNA 吸附柱講理論,放入一個(gè) RNase-free 1.5 ml 離心管中,向吸附膜的中央懸空滴加 30~50 μl 的 RNase-free H2O,室溫放置 1 min服務為一體,13,000 rpm 離心 1 min問題,管底即包含 miRNA 的總 RNA。
10. 提取的 RNA全會精神,可直接用于下游實(shí)驗(yàn)系統穩定性,或于-70℃保存,以免降解集中展示。
相關(guān)產(chǎn)品:
71418-25 Script III miRNA 1st Stand Synthesis Kit(加尾法)
71419-500 Script III miRNA Real-Time PCR Assay kit(for qPCR實力增強,加尾法)
71613-500 Script III miRNA RT-qPCR Detection kit(71418-25 + 71419-500)
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