動(dòng)物組織細(xì)胞RNA/DNA共提試劑盒
Tissue/Cell RNA/DNA Mini Kit(免lv仿)適用于從各種動(dòng)物組織調解製度、細(xì)胞中同時(shí)提取出總 RNA 和基因組 DNA,提取全程不需要使用lv仿完成的事情,得到包含總 RNA高質量,不需要DNase I消化流程,可直接用于 RT、RT-PCR優化服務策略、RT-qPCR關規定、RACE、芯片明顯、測(cè)序等安全鏈。動(dòng)物組織細(xì)胞RNA/DNA共提試劑盒
Tissue/Cell RNA/DNA Mini Kit
動(dòng)物組織/細(xì)胞 RNA/ DNA 共提試劑盒(免lv仿)
動(dòng)物組織細(xì)胞RNA/DNA共提試劑盒
目錄號(hào):91219
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91219-50(50 次) |
裂解液 MRL Plus | 50 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入zhi定量無(wú)水乙chun) |
RNase-Free ddH2O | 5 ml |
70%乙chun | 9 ml(需加入zhi定量無(wú)水乙chun) |
抑制物去除液 IR | 25 ml |
漂洗液 WB | 13 ml(需加入zhi定量無(wú)水乙chun) |
洗脫緩沖液 EB | 10 ml |
gDNA吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNA吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0ml液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無(wú)水乙chun
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Tissue/Cell RNA/DNA Mini Kit(免lv仿)適用于從各種動(dòng)物組織、細(xì)胞中同時(shí)提取出總 RNA 和基因組 DNA創新為先,提取全程不需要使用lv仿,得到包含總 RNA科普活動,不需要DNase I消化創新延展,可直接用于 RT、RT-PCR長期間、RT-qPCR基本情況、RACE、芯片高端化、測(cè)序等力量。基因組 DNA 也可以直接用于下游的 Southern提單產、mei切深入實施、PCR 等各種試驗(yàn)。
du特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞 RNase/DNase發展空間,然后裂解混合物RNA/DNA同時(shí)通過(guò)一個(gè)gDNA吸附柱效果,基因組DNA被吸附而RNA穿透濾過(guò)。gDNA 吸附柱上的基因組DNA經(jīng)過(guò)一系列漂洗足了準備、洗脫后得到純凈基因組DNA合作關系。濾過(guò)的總RNA,先用乙chun調(diào)節(jié)結(jié)合條件深刻內涵,然后轉(zhuǎn)入RNA吸附柱傳遞,在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于RNA吸附柱上,接著通過(guò)一系列快速的離心-漂洗-離心-洗脫深入闡釋,得到純凈的總RNA相關性。
注意事項(xiàng)
1. 采集 RNA 樣本時(shí),把新鮮組織樣本浸入 RNAsafe (RNA 樣品保存液防控,91115-100) 中成效與經驗,可在37℃保存一天,在25℃保存一周堅實基礎,在 4℃保存一個(gè)月稍有不慎,在-20℃或者–80℃長(zhǎng)期保存重要作用。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量最為顯著。
3. 提取時(shí)尤為突出,RNA 在裂解液 MRL Plus 中時(shí)不會(huì)被 RNase 降解,但后續(xù)處理過(guò)程中應(yīng)使用不含RNase的吸頭和器皿環境。
4. 樣品在加入裂解液 MRL Plus 并勻漿后空間載體,可在–80℃保存一個(gè)月以上。
5. 所有的溶液應(yīng)該是澄清的相對簡便,如果環(huán)境溫度低時(shí)溶液可能形成沉淀重要組成部分,此時(shí)不應(yīng)該直接使用,可在 37℃水浴加熱幾分鐘合作,即可恢復(fù)澄清勃勃生機。
重要提示:
① 第一次使用前, 請(qǐng)先在漂洗液 RW 、70%乙chun極致用戶體驗、漂洗液 WB 瓶中加入
zhi定量無(wú)水乙chun提供有力支撐,詳見瓶上的標(biāo)簽。
② 所有離心步驟均需要在室溫(15~25℃)下進(jìn)行建議,提取效果更佳品率!
操作步驟
1. 動(dòng)物組織:
a.電動(dòng)勻漿:取新鮮組織10~20 mg加入 500μl裂解液MRL Plus,電動(dòng)勻漿不斷發展,直到無(wú)明顯組織塊即可積極影響。
b.液氮研磨:液氮研磨組織成細(xì)粉,取10~20 mg組織細(xì)粉加入500μl 裂解液 MRL Plus集成,劇烈渦旋振蕩重要手段,直到無(wú)明顯粉末團(tuán)即可。
c. 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min穩定性,沉淀不能裂解的碎片像一棵樹。
d.下接操作步驟 3。
2. 細(xì)胞
a. 懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞去突破,加入500μl裂解液 MRL Plus(<8x106細(xì)胞), 吹打混勻性能穩定,劇烈渦旋振蕩20sec,充分裂解作用。
b. 貼壁細(xì)胞:不需要消化情況正常,吸棄培養(yǎng)基后,直接在培養(yǎng)皿/板中加裂解液MRL Plus(每<8x106細(xì)胞加500μl裂解液MRL Plus)進(jìn)行消化技術特點、裂解提高鍛煉;或者,先用胰mei消化后離心收集細(xì)胞凝聚力量,然后加入裂解液MRL Plus有所提升,吹打混勻聽得進,劇烈渦旋振蕩20sec,充分裂解先進水平。
c. 下接操作步驟 3便利性。
3. 將裂解勻漿物(或離心得到的上清)全部加入gDNA吸附柱中(吸附柱放入收集管中),13,000 rpm離心1min重要平臺,基因組DNA被吸附在膜上深刻認識,保留濾液(RNA 在濾液中)。把 gDNA 吸附柱放入2.0 ml離心管應用提升,置于4℃度主動性,以備提取DNA用。
以下是總RNA的提取步驟:
4. 向?yàn)V液中加入等體積的70%乙chun發展的關鍵,用移液器吹打混勻體系。
5. 每次轉(zhuǎn)移≤750μl濾液混合物至RNA吸附柱中,13,000 rpm離心1min帶動產業發展,此時(shí),RNA 被吸附在膜上十分落實,倒棄濾液倍增效應。
6. 加入700μl去蛋白液RW1,室溫放置1min,13,000rpm離心30sec製造業,倒棄濾液優化服務策略。
7. 加入500μl漂洗液RW(檢查是否已加入乙chun),13,000 rpm離30sec發展基礎,倒棄濾液兩個角度入手。
8. 重復(fù)步驟 7。
9. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中同期,13,000 rpm 離心2min探索,除去膜上殘留的乙chun。
10. 取出RNA吸附柱產業,放入RNase-free 1.5 ml離心管中滿意度,向RNA吸附膜的中央部位懸空滴加30~50μl 的RNase-free H2O,室溫放置 1 min可持續,13,000 rpm 離心1min主要抓手,管底即總 RNA。
11. 得到RNA構建,可直接用于下游實(shí)驗(yàn)創新科技,或于-70℃保存,以免降解共創輝煌。
以下是 DNA 的提取步驟:
12. 向步驟3的gDNA吸附柱中具有重要意義,加入500μl抑制物去除液IR進一步,12,000 rpm離心30sec,倒棄濾液功能。
13. 加入700μl漂洗液WB(檢查是否已加入乙chun)應用的因素之一,12,000 rpm離心30sec,倒棄濾液預期。
14. 加入500μl漂洗液WB敢於監督,12,000rpm 離心30sec,倒棄濾液結構。
15. 將 DNA 吸附柱放回空收集管中重要的作用,13,000rpm 離心2 min,甩干吸附膜上殘留的乙chun規模最大。
16. 取出 gDNA 吸附柱穩中求進,放入新的 1.5 ml 的離心管中,向吸附膜的中央懸空滴加100μl 洗脫緩沖液EB(洗脫緩沖液事先在65~70℃水浴中預(yù)熱效果更好)最深厚的底氣,室溫放置 3~5 min協同控製,12,000rpm離心1 min。將得到的溶液重新加入離心吸附柱中品質,室溫放置2min利用好,12,000 rpm離心1 min。
17. 得到的DNA可以存放在2~8℃解決問題,如果要長(zhǎng)時(shí)間存放系列,可以放置在- 20℃。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
動(dòng)物組織細(xì)胞RNA/DNA共提試劑盒