2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
本產(chǎn)品包含Long Taq DNA Polymerase深刻認識、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液優化上下,濃度為2×,擴(kuò)增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍,保真度是Taq酶的3倍, 適用于擴(kuò)增各種長達(dá)10Kb的DNA模板發揮重要作用!PCR產(chǎn)物3’端帶A頭,純化后可直接用于TA載體克隆數據顯示。2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
2× Long Taq PCR Master Mix(含染料)
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)
目錄號:71115
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 71115-05 | 71115-0100 |
2× Long Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存條件
-20℃保存高質量,有效期2年。經(jīng)常使用記得牢,可置于4°C保存註入了新的力量,有效期3個月。
產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品包含Long Taq DNA Polymerase更多可能性、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液去創新,濃度為2×,擴(kuò)增速度(5-10s/kb)是普通Taq mix速度的6倍重要性,保真度是Taq酶的3倍又進了一步, 適用于擴(kuò)增各種長達(dá)10Kb的DNA模板!PCR產(chǎn)物3’端帶A頭多元化服務體系,純化后可直接用于TA載體克隆規劃。
本產(chǎn)品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳深度;也可經(jīng)過純化處理帶動擴大,以用于酶切、連接開拓創新、測序等后續(xù)操作持續發展。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 高產(chǎn):產(chǎn)量是普通 Taq 酶的 2 倍!
2. 高效:延伸速度 5-10s/kb促進善治,一般 0.5 小時完成 PCR擴大!
3. 高成功率:對于高 GC 模板和特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板有良好效果!
2 × Long Taq PCR Master Mix 使用說明:
一道路、 配制 PCR 反應(yīng)體系:(于冰上配制)
Component | 20μlReaction | 50 μl Reaction | FinalConcentration |
2×Long Taq PCR Mix | 10 μ | 25 μ | 1 × |
Forward Primer(10 μM) | 0.8 μ | 2 μl | 0.4 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.8 μl | 2 μ | |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
參考模板用量(50 μl 反應(yīng)體系):
質(zhì)粒:0.1-10 ng規模設備;細(xì)菌基因組:10-100 ng;人類基因組:0.1-1 μg指導;cDNA:1-5 μl 競爭力。
二、建議 PCR 循環(huán)條件:
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 15 seconds |
30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 30 seconds | |
Extension | 72℃ | 60 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事項(xiàng):
擴(kuò)增長片段進一步完善,引物一般終濃度為 0.3-1μM集聚,長度最好為 27-36bp;退火溫度一般在 65℃-70℃調整推進,使用 2 步擴(kuò)增法狀況,即退火/延伸合為一步;如果設(shè)計的引物在 20bp 左右機製,則使用 3 步擴(kuò)增法為好全過程。擴(kuò)增效果不佳時,還可加入 DMSO 到終濃度 2-4%使命責任。
2×Long Taq PCR Master Mix(含染料)