2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑迎難而上，為2x 預(yù)混液，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分數據顯示，可減少操作步驟基本情況，縮短加樣時間帶動擴大，降低污染幾率穩定。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶改造層面，配合精心優(yōu)化的Buffer體系，有效抑制非特異性擴增。2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
目錄號：71321
產(chǎn)品內(nèi)容
Components | 71321-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71321-2500 2500 rxns (20 μl/rxn) |
2x SYBR qPCR Mix | 5x 1ml | 25x 1ml |
保存條件
-20℃保存經驗分享，有效期 24 個月解決方案。使用前，充分融解系列，輕柔顛倒混勻作用，短期使用可放在4 ℃，避免反復(fù)凍融慢體驗。
產(chǎn)品簡介
2x SYBR qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試劑高質量，為2x 預(yù)混液，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分重要組成部分，可減少操作步驟，縮短加樣時間合作，降低污染幾率勃勃生機。其核心組分是全新抗體法的Hotmaster Taq DNA聚合酶，配合精心優(yōu)化的Buffer體系極致用戶體驗，有效抑制非特異性擴增提供有力支撐，可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結(jié)果建議，具有靈敏度高品率、特異性強、穩(wěn)定性好等特點不斷發展。
本品不含參比染料ROX積極影響，適用于不需要ROX校準的儀器，常見的是Bio-rad系列緊密協作、Roche越來越重要、國產(chǎn)qPCR儀。Roche發揮重要作用、國產(chǎn)qPCR儀醒悟。
操作步驟：
1. 將DNA模板、引物高質量、2 x SYBR qPCR Mix也逐步提升、ddH2O溶解并置于冰上備用。
2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系：（以20μl反應(yīng)體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2x SYBR qPCR Mix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
ddH2O | Up to 20 μl | Not applicable |
注意：
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系註入了新的力量，cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%重要的作用，基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同去創新，可對模板進行梯度稀釋積極回應，以確定最佳的模板使用量。
2） 通常推薦引物濃度為0.2 μM，就可以得到較好的結(jié)果有所提升，反應(yīng)效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進行調(diào)整聽得進。擴增效率不高的情況下，可提高引物濃度先進水平；發(fā)生非特異性反應(yīng)時便利性，可降低引物濃度，由此優(yōu)化反應(yīng)體系重要平臺。
3. qPCR反應(yīng)程序
注意：
1） 本產(chǎn)品兼容性強深刻認識，絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。一般來說應用提升，二步法擴增特異性高主動性，三步法擴增效率高。如果融鏈曲線較差發展的關鍵，可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度道路；如果因使用Tm值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結(jié)果時真諦所在，可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增指導。
2） 根據(jù)引物的Tm值進行退火&延伸（退火）溫度的設(shè)定；
3） 延伸（退火&延伸）時間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時間自行調(diào)整充分。
4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設(shè)定進一步完善。
2x SYBR qPCR Mix（Without ROX）熒光定量
