2 x Universal Probe qPCR Mix 熒光定量
2x Universal Probe qPCR Mix是探針法專用的qPCR試劑穩定，為2x 預混液不斷發展，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分空間廣闊，可減少操作步驟進一步意見，縮短加樣時間改善，降低污染幾率非常重要。2 x Universal Probe qPCR Mix 熒光定量
2x Universal Probe qPCR Mix
2 x Universal Probe qPCR Mix 熒光定量
目錄號：71319
產品內容
Components | 71319-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71319-2500 2500 rxns (20 μl/rxn) |
2x Universal Probe qPCR Mix | 1.25 ml x4 | 1.25 ml x20 |
RNase-Free H2O | 5 ml | 5 ml x5 |
保存條件
-20℃保存進一步提升，有效期24個月。使用前營造一處，充分融解改革創新，輕輕顛倒混勻，短期使用可放在 4 ℃資源優勢，避免反復凍融高效利用。
產品簡介
2x Universal Probe qPCR Mix是探針法專用的qPCR試劑，為2x 預混液估算，包含除引物和DNA樣品以外的所有qPCR組分講理論，可減少操作步驟，縮短加樣時間基礎上，降低污染幾率各領域。
其核心組分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶，配合精心優(yōu)化的Buffer體系保持競爭優勢，有效抑制非特異性擴增進行培訓，可對寬廣濃度范圍的模板進行準確定量，獲得穩(wěn)定可靠的qPCR結果長效機製，具有靈敏度高法治力量、特異性強、穩(wěn)定性好等特點分享。適用于DNA或cDNA的靶序列檢測共享、基因表達分析、拷貝數分析方式之一、SNP分型等生動。
預混液中已添加有通用型ROX，適用于各種qPCR儀，使用時不需要額外添加ROX來校正儀器新品技。
操作步驟：
1. 將DNA模板範圍、引物、探針紮實做、2 x Universal Probe qPCR Mix空間廣闊、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。
2. 冰上配制qPCR反應體系：（以20μl反應體系為例）
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2 x Universal Probe qPCRMix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.5 μl | 0.25 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.5 μl | 0.25 μM each |
Probe (10μM) | 0.5 μl | 0.25 μM each |
RNase free H2O | Up to 20 μl | Not applicable |
1） 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系提供深度撮合服務，cDNA原液≤總反應體系的10%雙重提升，基因組DNA的量為10-100 ng。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數不同事關全面，可對模板進行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量狀態。
2） 通常引物濃度為0.25 μM技術節能，就可以得到較好的結果，反應效果不佳時可在0.1 - 1.0 μM范圍內進行調整廣泛認同。擴增效率不高的情況下國際要求，可提高引物濃度；發(fā)生非特異性反應時鍛造，可降低引物濃度競爭激烈，由此優(yōu)化反應體系。
3. qPCR反應程序
注意：
1） 本產品兼容性強工具，絕大多數情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果智慧與合力。一般來說，二步法擴增特異性高重要的角色，三步法擴增效率高開放要求。如果融鏈曲線較差，可以嘗試兩步法擴增或提高退火溫度平臺建設；如果因使用Tm值較低的引物等原因服務機製，得不到良好的實驗結果時，可嘗試加長延伸時間或者進行三步法PCR擴增使用。
2） 根據引物的Tm值進行退火&延伸（退火）溫度的設定大幅拓展；
3） 延伸（退火&延伸）時間的設置還需要根據您所使用的qPCR儀所需要的最短數據采集時間自行調整。
4） 融解曲線分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進行設定更加堅強。
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